ٹشو بلاک کے حجم پر حیاتیاتی خوردبین
کنڈینسر کے ساتھ ایک حیاتیاتی خوردبین اس کی چمک کو معتدل بنانے کے لیے کنڈینسر کو اوپر اور نیچے لے جا سکتا ہے، اور 9b کی معتدل چمک حاصل کرنے کے لیے متغیر لائٹ اینالائزر کے یپرچر کو بھی تبدیل کر سکتا ہے۔ اگر روشنی دھوپ میں ہے تو، کنڈینسر کو مناسب طریقے سے اٹھایا جا سکتا ہے، اور متغیر آپٹیکل شور کے یپرچر کو مناسب طریقے سے بڑھایا جا سکتا ہے۔ اگر روشنی بہت مضبوط ہے تو، کنڈینسر کو مناسب طریقے سے کم کیا جا سکتا ہے، اور چوراہے کے یپرچر کو مناسب طریقے سے کم کیا جا سکتا ہے۔ اگر آپ اب بھی اس معاملے میں شاندار محسوس کرتے ہیں، تو آپ ایک مناسب فلٹر کا انتخاب کر سکتے ہیں اور اسے کنڈینسر کے نیچے بریکٹ پر رکھ سکتے ہیں۔ یہ تسہ ایک ایسی چمک حاصل کر سکتا ہے جو آپ کو مطمئن کرے۔ بلاشبہ، آپٹیکل ریڈنگ کے یپرچر کے سائز کو تبدیل کرنے اور مناسب فلٹرز کو منتخب کرنے کے لیے کنڈینسر کی اوپری اور نچلی پوزیشنوں کو ایڈجسٹ کرنے کے لیے مشق کی ایک خاص مدت کے بعد تجربہ حاصل کرنا ضروری ہے۔
بائیو مائیکروسکوپ کا ایک بہت اہم مسئلہ یہ ہے کہ فریز ڈرائینگ اور ریزن ایمبیڈنگ (FD) اور فریز ڈرائینگ کے بعد ہر حصے میں 65 عناصر کے مواد کو احتیاط سے ہینڈل کیا جانا چاہیے، تاکہ مشاہدہ اور تجزیہ کیے جانے والے خلیوں کو نقصان نہ پہنچے۔ چونکہ ایکس رے مائیکرو تجزیہ میں نہ صرف بہت سے مراحل شامل ہوتے ہیں، بلکہ اس میں بہت زیادہ لاگت بھی آتی ہے، اس لیے یہ غلط نتیجہ اخذ کرنا بہت افسوسناک ہے کہ اگر تجزیہ کیے گئے خلیے طویل مدتی اور کثیر المدتی علاج کے بعد تباہ شدہ خلیے یا مردہ خلیے ہیں۔ مثال کے طور پر، کولیجینیز علاج کے ذریعے الگ کیے گئے مایوکارڈیل سیل کی دو شکلیں ہیں، ایک لمبی چھڑی اور دوسری گول۔ مؤخر الذکر ایک مرنے والا خلیہ ہے جو سیل کی علیحدگی کے دوران خراب ہو جاتا ہے۔
حیاتیاتی خوردبین کے تحت ان دو قسم کے خلیوں میں الیکٹرولائٹس کا مواد اور تقسیم بہت مختلف ہے۔ گول مایوکارڈیل خلیوں میں Na بہت زیادہ ہے اور K بہت کم ہے، اور لکیری ڈینڈرائٹس میں ca کا ارتکاز بہت زیادہ ہے۔ دیگر تجزیاتی طریقوں کے مقابلے میں، یہ ثابت ہوتا ہے کہ سرکلر سیلز میں ہائی Na اور لو K اور مائٹوکونڈریا میں ہائی سی اے سیل کی علیحدگی کے دوران سیل کی جھلی کو پہنچنے والے نقصان کے نتائج ہیں۔ خلیات اور بافتوں کے ٹھنڈے فکسیشن کا طریقہ اکثر یہ ہے کہ انہیں پہلے بجھایا جائے، اور پھر انہیں مائع نائٹروجن میں محفوظ کیا جائے۔ تحفظ کے اثر کے لیے بجھانا فکسشن بہت اہم ہے۔ زندہ خلیات یا تازہ ٹشوز پانی سے بھرپور ہوتے ہیں۔ بجھاتے وقت، اکثر ایسا ہوتا ہے کہ خلیات یا بافتوں کے وہ حصے جو کریوپروٹیکنٹس کے ساتھ براہ راست رابطے میں ہوتے ہیں (خاص طور پر جب مائع نائٹروجن کے ساتھ بجھتے ہیں) پہلے منجمد اور فکس ہوتے ہیں، اس طرح ایک "شیل" بنتا ہے، جو مرکزی کے جمنے اور ٹھیک ہونے میں رکاوٹ بنتا ہے۔ خلیات کا حصہ. لہذا، ایکس رے مائیکرو تجزیہ کرتے وقت، یہ اکثر پایا جاتا ہے کہ بڑے خلیوں کے مرکز میں برف کے کرسٹل موجود ہیں۔ ایسا ہونے سے روکنے کے لیے، مائع نائٹروجن سے زیادہ پگھلنے کا نقطہ لیکن 806c سے کم خشک ہونے والے درجہ حرارت کو کولنگ ایجنٹ کے طور پر استعمال کیا جاتا ہے۔ اس طرح کے بہت سے مادے ہیں، لیکن سب سے زیادہ آسانی سے دستیاب ایک مرتکز پروپین ہے (ابائلنگ پوائنٹ-42120c، پگھلنے کا نقطہ-18710c، سالماتی وزن-44.1)، جس میں تیز ترین کولنگ کی رفتار. لیکن اس کا نقصان flammability ہے.
حیاتیاتی خوردبین پٹھوں کے ریشے کو ایک خاص فریم پر رکھ سکتی ہے، اور جب پٹھوں کا ریشہ کسی خاص مرحلے میں سکڑ جاتا ہے اور اسے ٹھیک کرنے کی ضرورت ہوتی ہے، تو نوزل کو فوری طور پر شروع کر دیا جاتا ہے، تاکہ مائع پروپین کو بجھانے اور ٹھیک کرنے کے لیے پٹھوں کے ریشے پر اسپرے کیا جائے۔ یہ. پھر، پٹھوں کے ریشوں کو ریک کے ساتھ باہر نکال کر مائع نائٹروجن میں ڈالا جاتا ہے۔ اگر خون کے خلیات یا الگ کیے گئے خلیے ٹھیک ہو جائیں تو پہلے خلیات کو مرتکز کرنے کے لیے کم رفتار سے سینٹری فیوج کریں، خلیات کو اچھی تھرمل چالکتا والی چاندی کی چھوٹی ٹیوب میں منتقل کریں، اور چھوٹی ٹیوب کو منجمد اور ٹھیک کرنے کے لیے مائع پروپین میں ڈالیں۔ ہال لیبارٹری میں چوہے کے لبلبے کو ٹھیک کرتے وقت، دو سٹیل کے بلاکس کو مائع ہیلیم (یا مائع نائٹروجن) کے ساتھ پہلے سے ٹھنڈا کیا گیا تھا، اور لبلبے کے آگے اور پیچھے چمٹا کے ساتھ دو تانبے کے بلاکس رکھے گئے تھے، تاکہ آنٹوں کو بجھایا جائے اور ٹھیک کیا جائے۔ ٹشو یا خلیات کو بجھانے اور طے کرنے اور مائع نائٹروجن میں منتقل کرنے کے بعد طویل عرصے تک ذخیرہ کیا جا سکتا ہے۔
