حیاتیاتی مائکروسکوپی ٹشو بلاکس کے حجم پر کی جاتی ہے۔
حیاتیاتی خوردبینیں کنڈینسر والی مائکروسکوپ اس کی چمک کو معتدل بنانے کے لیے کنڈینسر کو اوپر اور نیچے لے جا سکتی ہیں، اور متغیر روشنی کی توسیع کے یپرچر کو بھی تبدیل کر سکتی ہیں تاکہ ایک معتدل 9b چمک حاصل کی جا سکے۔ اگر روشنی دھوپ والی ہو تو کنڈینسر کو اوپر کی طرف لے جایا جا سکتا ہے اور متغیر روشنی کے یپرچر کو بڑھایا جا سکتا ہے۔ اگر روشنی بہت مضبوط ہے، تو اسپاٹ لائٹ آئینہ مناسب نیچے ہو سکتا ہے، مناسب کمی کے لیے متغیر لائٹ لیپ کا یپرچر۔ اگر اس معاملے میں اب بھی اندھا محسوس ہوتا ہے، تو آپ اسپاٹ لائٹ کے نیچے بریکٹ میں رکھے ہوئے مناسب فلٹر کا انتخاب کرسکتے ہیں۔ یہ آپ کو چمک سے مطمئن کرنے کے لیے حاصل کیا جا سکتا ہے۔ بلاشبہ، کمڈینسر لینس کے اوپری اور نچلے عہدوں کی ایڈجسٹمنٹ میں روشنی پڑھنے کے یپرچر کے سائز اور مناسب فلٹرز کے انتخاب میں فرق ہوسکتا ہے، جو کہ مشق اور تجربے کی ایک خاص مدت کے بعد ہوتا ہے۔
حیاتیاتی خوردبین ایک بہت اہم مسئلہ خلیوں کے نمونے لینے اور الگ کرنے کے عمل میں ہے، الٹرا بکلیٹس کو منجمد کرنے کے بعد منجمد خشک کرنے اور رال ایمبیڈنگ (ایف ڈی)، 65 عنصری ساخت کے مواد کے ہر حصے کو ٹھیک چلانے کے بعد منجمد خشک کرنے کا عمل ہونا ضروری ہے۔ بہت احتیاط سے ہینڈل کیا جاتا ہے، اور مشاہدہ اور تجزیہ کرنے والے خلیوں کو نقصان نہیں پہنچانا چاہیے۔ کیونکہ ایکس رے مائیکرو ایریا کا تجزیہ نہ صرف بہت سارے اقدامات کا ہوتا ہے، اور لاگت بہت زیادہ ہوتی ہے، اگر ایک طویل وقت اور متعدد مراحل کی پروسیسنگ کے بعد، تجزیہ شدہ خلیات خراب خلیات یا مردہ خلیات ہیں، غلط نتیجہ اخذ کرنے کے لیے بہت افسوسناک ہے. مثال کے طور پر، کولیجینیز علاج سے الگ تھلگ کارڈیو مایوسائٹس کی دو شکلیں ہیں، ایک لمبی چھڑی کی شکل کی اور دوسری گول۔ مؤخر الذکر مرتے ہوئے خلیات ہیں جو سیل الگ تھلگ کرنے کے عمل کے دوران خراب ہوئے تھے۔
حیاتیاتی خوردبین کو ایک خاص ریک پر رکھا جا سکتا ہے، تاکہ اس myofibre کا سکڑاؤ ایک خاص وقت تک پہنچ جائے جب اسے ٹھیک کرنے کی ضرورت ہو، اور پھر فوری طور پر نوزل کو چالو کریں، تاکہ مائع پروپین کو myofibre پر اسپرے کیا جائے، تاکہ یہ بجھا ہوا ہے اور ٹھنڈا ہے۔ پھر پٹھوں کے ریشے کو ریک کے ساتھ باہر نکال کر مائع نائٹروجن میں ڈالا جاتا ہے۔ خون کے خلیات یا الگ تھلگ خلیات، خلیات توجہ مرکوز کرنے کے لئے سب سے پہلے کم رفتار centrifugation فکسنگ تو، خلیات چاندی کی ٹیوب کی ایک اچھی تھرمل چالکتا میں منتقل کیا جائے گا، مائع پروپین لوت سرد میں ٹیوب فکسڈ. ہال لیبارٹری فکسڈ چوہا لبلبہ، مائع ہیلیم (یا مائع نائٹروجن) کے ساتھ سٹیل کے پہلے دو ٹکڑوں کو پری کولنگ، کلیمپ کے ساتھ تانبے کے دو ٹکڑوں کو لبلبہ کے آگے اور پیچھے رکھا جائے گا، تاکہ خالہ کی خالہ غدود بجھانے والی سردی کا تعین۔ ٹشوز یا خلیات کو بجھانے اور ٹھیک کرنے کے بعد مائع نائٹروجن میں منتقل کر کے لمبے عرصے تک ذخیرہ کیا جا سکتا ہے۔
بائیو مائیکروسکوپی منجمد الٹراتھن حصوں کے موجودہ *ترقی یافتہ* طریقہ کے علاوہ، سائنس دانوں کے ذریعہ استعمال کی جانے والی مزید جمع کرنے کی تکنیک یہاں بیان کی گئی ہے۔ تجزیہ سے پہلے ایک مادہ شامل کیا جاتا ہے تاکہ اس کو متحرک کرنے کے لیے تجزیہ کیے جانے والے جزو کے ساتھ جمع کیا جائے، اور اس کے بعد جمع کا تجزیہ کیا جاتا ہے۔ مثال کے طور پر، oxalate اور pyroantimonate عام طور پر myocytes میں ca جمع کرنے کے لیے استعمال ہوتے ہیں۔ سابقہ سائٹوپلازم میں ca کی کم ارتکاز کے لیے کافی حساس نہیں ہے۔ پائروانٹیمونیٹ کی حساسیت زیادہ ہوتی ہے اور یہ پلازما میں مفت ca کے ساتھ الیکٹرانک طور پر گھنے ذخائر بناتا ہے، لیکن پائروانٹیمونیٹ سوڈیم، مینگنیج، بیریم اور آئرن کے ساتھ ذخائر بھی بناتا ہے، جن کی خاصیت غریب ہے۔ نمونہ کی تیاری کا عمل عام ٹرانسمیشن الیکٹران مائیکروسکوپی الٹراتھائن سیکشن کے نمونوں کی طرح تھا، اس فرق کے ساتھ کہ 3% پوٹاشیم پائروانٹیمونیٹ (فاسفیٹ بفر، پی ایچ 7.6) فکس کرنے سے 6 گھنٹے پہلے، اور پٹھوں کے داغ دار الٹراتھن حصوں پر، ہر ایک myonectomy سیکشن کے A اور 2 بینڈ کی درمیانی لکیر میں ایک سیاہ رنگ دیکھا گیا، اور پھر غیر داغدار حصوں کو ایکس رے مائیکرو ایریا تجزیہ کے لیے استعمال کیا گیا۔ Diaminobenzidine tetrahydrochloride (DAB) دوسروں کے درمیان ہیموگلوبن پر مشتمل مواد کو تیز کرنے کے لیے استعمال کیا گیا ہے۔ ہسٹو کیمسٹری اور ایکس رے مائیکرو ایریا برج کے اس قسم کے ورن کے رد عمل کو ان لیبارٹریوں میں استعمال کیا جا سکتا ہے جن میں منجمد انتہائی پتلے حصوں کی حالت نہیں ہوتی ہے۔ تجزیہ کیے جانے والے عناصر کی چوٹی کی بلندیوں کو نیم مقداری تجزیہ کے لیے استعمال کیا جا سکتا ہے۔
