عام روشنی خوردبین اور فلوروسینس مائکروسکوپ کے درمیان فرق
آپٹیکل مائیکروسکوپ: یہ ایک نظری آلہ ہے جو نظری اصولوں کا استعمال کرتے ہوئے چھوٹی چیزوں کی تصویر کشی کرتا ہے جنہیں انسانی آنکھ سے حل نہیں کیا جاسکتا، تاکہ لوگ مائیکرو اسٹرکچر کی معلومات نکال سکیں۔
فلوروسینس مائیکروسکوپ: فلوروسینس خوردبین الٹرا وائلٹ روشنی کو روشنی کے ذریعہ کے طور پر استعمال کرتا ہے تاکہ معائنہ کے تحت آبجیکٹ کو شعاعوں سے خارج کیا جاسکے اور پھر خوردبین کے نیچے آبجیکٹ کی شکل اور مقام کا مشاہدہ کیا جاسکے۔ فلوروسینس مائیکروسکوپی کا استعمال خلیوں میں مادوں کے جذب اور نقل و حمل، کیمیائی مادوں کی تقسیم اور لوکلائزیشن وغیرہ کا مطالعہ کرنے کے لیے کیا جاتا ہے۔ خلیوں میں کچھ مادے، جیسے کہ کلوروفل، بالائے بنفشی شعاعوں کے شعاع کے بعد فلوروسیس کر سکتے ہیں۔ اگرچہ کچھ مادے خود فلوروسینٹ نہیں ہوسکتے ہیں، وہ الٹرا وایلیٹ شعاعوں سے شعاع ہونے کے بعد فلوروسینٹ رنگوں یا فلوروسینٹ اینٹی باڈیز سے داغے جانے کے بعد بھی فلوروسینٹ ہوسکتے ہیں۔ فلوروسینس مائیکروسکوپی ایسے مادوں پر معیار اور مقداری تحقیق کے لیے ایک ٹول ہے۔
ایک نظری خوردبین عام طور پر ایک اسٹیج، ایک اسپاٹ لائٹ لائٹنگ سسٹم، ایک معروضی لینس، ایک آئی پیس، اور ایک فوکسنگ میکانزم پر مشتمل ہوتا ہے۔ روشنی کے طریقہ کار کو تبدیل کرنے سے، اسپاٹ لائٹ لائٹنگ سسٹم مختلف مشاہدے کے طریقے حاصل کر سکتا ہے جیسے روشن پس منظر پر تاریک آبجیکٹ پوائنٹس (جسے روشن فیلڈ الیومینیشن کہا جاتا ہے) یا گہرے پس منظر پر روشن آبجیکٹ پوائنٹس (جسے ڈارک فیلڈ الیومینیشن کہا جاتا ہے)، تاکہ بہتر طریقے سے دریافت کیا جا سکے۔ اور مختلف حالات میں مائیکرو اسٹرکچر کا مشاہدہ کریں۔
فلوروسینس خوردبینیں درج ذیل طریقوں سے عام خوردبین سے مختلف ہوتی ہیں۔
1. روشنی کا طریقہ عام طور پر ایپسکوپک ہوتا ہے، یعنی روشنی کا منبع معروضی عینک کے ذریعے نمونے پر پیش کیا جاتا ہے۔
2. روشنی کا منبع بالائے بنفشی روشنی ہے، طول موج کم ہے، اور ریزولوشن عام خوردبینوں سے زیادہ ہے۔
3. دو خاص فلٹرز ہیں، روشنی کے منبع کے سامنے والا ایک نظر آنے والی روشنی کو فلٹر کرنے کے لیے استعمال کیا جاتا ہے، اور آئی پیس اور آبجیکٹیو لینس کے درمیان والا ایک انسانی آنکھوں کی حفاظت کے لیے الٹرا وائلٹ شعاعوں کو فلٹر کرنے کے لیے استعمال کیا جاتا ہے۔
فلوروسینس مائکروسکوپ بھی ایک قسم کی نظری خوردبین ہے، بنیادی فرق یہ ہے کہ دونوں کی اتیجیت طول موج مختلف ہے۔ یہ ساخت اور استعمال کے لحاظ سے فلوروسینس مائکروسکوپ اور عام آپٹیکل مائکروسکوپ کے درمیان فرق کا تعین کرتا ہے۔
امیونو فلوروسینٹ سائٹو کیمسٹری میں فلوروسینس مائکروسکوپی ایک ضروری ٹول ہے۔ یہ اہم اجزاء پر مشتمل ہے جیسے روشنی کا ذریعہ، فلٹر پلیٹ سسٹم اور آپٹیکل سسٹم۔ یہ روشنی کی ایک مخصوص طول موج کا استعمال کرتے ہوئے نمونہ کو فلوروسینس کے اخراج کے لیے پرجوش کرنے کے لیے ہے، اور معروضی لینس اور آئی پیس سسٹم کو بڑھا کر نمونے کی فلوروسینس امیج کا مشاہدہ کرنا ہے۔
