فلوروسینس خوردبین کے نکات اور چالیں۔
(i) سلائیڈز
سلائیڈ کی موٹائی 0.8 اور 1.2 ملی میٹر کے درمیان ہونی چاہیے، بہت موٹی ڈھلوان، ایک طرف، زیادہ روشنی جذب، دوسری طرف، جمع کیے گئے نمونے میں روشنی کا جوش پیدا نہیں کر سکتی۔ سلائیڈ ہموار، یکساں موٹائی، کوئی واضح آٹو فلوروسینس نہیں ہونی چاہیے۔ کبھی کبھی کوارٹج گلاس سلائیڈز کی ضرورت ہوتی ہے۔
(ii) کور سلپس
تقریباً 0.17 ملی میٹر کی کور سلپ موٹائی، صاف۔ حوصلہ افزائی کی روشنی کو بڑھانے کے لیے، کورسلپ کے ساتھ مداخلت کرنے کے لیے بھی استعمال کیا جا سکتا ہے، جو کہ روشنی کی مختلف طول موج کی متعدد تہوں کے ساتھ چڑھائی ہوئی ایک خاص سطح ہے جو مادوں (جیسے میگنیشیم فلورائیڈ) کی مداخلت میں مختلف کردار ادا کرتی ہے۔ کور سلپ، جو روشنی کے ہموار اور عکاس اتیجیت کے ذریعے فلوروسینس بنا سکتی ہے، روشنی کی عکاسی کا جوش نمونہ عورت کا جوش ہو سکتا ہے۔
(iii) نمونے
ٹشو سیکشن یا دیگر نمونے بہت موٹے نہیں ہو سکتے، جیسے کہ بہت موٹی اتیجیت روشنی زیادہ تر نمونے کے نچلے حصے میں کھائی جاتی ہے، اور معروضی لینس براہ راست ناکافی اتیجیت کے اوپری حصے میں مشاہدہ کیا جاتا ہے۔ اس کے علاوہ، سیل اوورلیپ یا نجاست کا ماسکنگ، فیصلے کو متاثر کرتا ہے۔
(D) سگ ماہی کا ایجنٹ
سگ ماہی ایجنٹ عام طور پر استعمال کیا جاتا ہے گلیسرول، آٹو فلوروسینس سے پاک، بے رنگ اور شفاف ہونا چاہیے، پی ایچ 8.5 ~ 9.5 میں فلوروسینس کی چمک زیادہ روشن ہے، جلدی ختم ہونا آسان نہیں ہے۔ لہذا، عام طور پر استعمال ہونے والی گلیسرین اور 0.5mol/lpH90 ~ 9.5 کاربونیٹ بفر کے برابر مقدار میں مرکب سیل کرنے والے ایجنٹ کے لیے۔
(ای) آئینے کا تیل
جنرل ڈارک فیلڈ فلوروسینس مائکروسکوپ اور آئل آئینے کے نمونے کا مشاہدہ، آئینے کا تیل ضرور استعمال کریں، ترجیحاً خصوصی نان فلوروسینٹ آئینے کا تیل استعمال کریں، مذکورہ گلیسرول کی جگہ پر بھی استعمال کیا جا سکتا ہے، مائع پیرافین بھی استعمال کیا جا سکتا ہے، لیکن ریفریکٹو انڈیکس نچلے حصے میں، تصویر کے معیار کو قدرے متاثر کرتا ہے۔
