کیا آپ نے کبھی فیز کنٹراسٹ مائکروسکوپی کے بنیادی اصولوں کو سمجھا ہے؟
فیز کنٹراسٹ خوردبین 1935 میں ڈچ سائنس دان زرنائیک نے غیر داغدار نمونوں کے مشاہدے کے لیے ایجاد کی تھی۔ زندہ خلیوں اور غیر داغدار حیاتیاتی نمونوں کے لیے، خلیے کے ہر حصے کے مائیکرو اسٹرکچر کی اضطراری انڈیکس اور موٹائی میں فرق کی وجہ سے، جب روشنی کی لہر وہاں سے گزرتی ہے تو طول موج اور طول و عرض میں کوئی تبدیلی نہیں آتی، صرف مرحلہ بدلتا ہے (طول و عرض کا فرق )، جو انسانی آنکھ سے پوشیدہ ہے۔ مشاہدہ. فیز کنٹراسٹ خوردبین مرحلے کے فرق کو تبدیل کرتا ہے اور زندہ خلیوں اور غیر داغدار نمونوں کا مشاہدہ کرنے کے لیے مرحلے کے فرق کو طول و عرض کے فرق میں تبدیل کرنے کے لیے روشنی کے پھیلاؤ اور مداخلت کے مظاہر کا استعمال کرتا ہے۔ فیز کنٹراسٹ مائیکروسکوپ اور عام خوردبین کے درمیان فرق یہ ہے کہ متغیر ڈایافرام کی بجائے اینولر ڈایافرام استعمال کیا جاتا ہے، عام معروضی لینس کے بجائے فیز پلیٹ والا معروضی لینس استعمال کیا جاتا ہے، اور سماکشی کے لیے ایک دوربین فراہم کی جاتی ہے۔
فیز کنٹراسٹ مائکروسکوپی کے بنیادی اصول:
آبجیکٹ کے مختلف ساختی اجزاء کے درمیان ریفریکٹیو انڈیکس اور موٹائی میں فرق کا استعمال کرتے ہوئے، آبجیکٹ کے مختلف حصوں سے گزرنے والے نظری راستے کے فرق کو طول و عرض (روشنی کی شدت) کے فرق میں تبدیل کیا جاتا ہے، اور کنڈینسر لینس کے ذریعے کنڈلی ڈایافرام اور فیز پلیٹ کے ساتھ فیز کا فرق معروضی لینس مشاہداتی خوردبین کو محسوس کرتا ہے۔ یہ بنیادی طور پر زندہ خلیوں یا غیر داغدار بافتوں کے حصوں کا مشاہدہ کرنے کے لیے استعمال ہوتا ہے، اور بعض اوقات اسے داغدار نمونوں کا مشاہدہ کرنے کے لیے بھی استعمال کیا جا سکتا ہے جن میں تضاد نہیں ہے۔
نمونے سے گزرنے والی مرئی روشنی کے نظری راستے کے فرق کو طول و عرض کے فرق میں تبدیل کر دیا جاتا ہے، اس طرح مختلف ڈھانچوں کے درمیان تضاد کو بہتر بنایا جاتا ہے اور مختلف ڈھانچوں کو واضح طور پر نظر آتا ہے۔ روشنی نمونے سے گزرنے کے بعد ریفریکٹ ہوتی ہے، اصل نظری راستے سے ہٹ جاتی ہے، اور 1/4λ (طول موج) کی تاخیر ہوتی ہے۔ اگر اسے 1/4λ سے بڑھایا یا کم کیا جائے تو نظری راستے کا فرق 1/2λ ہو جاتا ہے، اور دو بیم روشنی کے محور کے بعد مداخلت کرتے ہیں، طول و عرض کو مضبوط کریں، بڑھائیں یا کم کریں، کنٹراسٹ کو بہتر بنائیں۔
فیز کنٹراسٹ مائیکروسکوپ کے دو کام ہوتے ہیں جو دوسری خوردبینوں میں نہیں ہوتے ہیں: ① یہ براہ راست روشنی (منظر کے میدان میں پس منظر کی روشنی) کو آبجیکٹ کے ذریعے الگ ہونے والی روشنی سے الگ کرتا ہے۔ ② یہ مرحلے سے تقریباً نصف طول موج کو ہٹا دیتا ہے تاکہ یہ تعامل نہ کر سکے، جس کے نتیجے میں شدت میں تبدیلی آتی ہے۔
