فلوروسینس مائکروسکوپی کے روشن اور تاریک شعبوں کے لیے امیجنگ کے طریقے
(1) برائٹ فیلڈ امیجنگ (BFI)، جو صرف پیراکسیل ریجن میں منتقل شدہ الیکٹرانوں کو مقصدی یپرچر سے گزرنے کی اجازت دیتا ہے، جس سے روشن پس منظر پر ایک سیاہ تصویر بنتی ہے۔ معروضی لینس کا یپرچر جتنا چھوٹا ہوگا، روشن فیلڈ امیج کا تضاد اتنا ہی زیادہ ہوگا۔ (2) ڈارک فیلڈ امیجنگ (DFI)، جو منتقلی بیم کو مسدود کرتے ہوئے، صرف ایک بڑے زاویہ سے بکھرے ہوئے شہتیر کے ایک حصے یا کرسٹل کے ایک پھیلاؤ والے شہتیر کو مقصدی لینس کے یپرچر سے گزرنے کی اجازت دیتا ہے۔ یہ ایک سیاہ پس منظر پر ایک روشن گرافک امیج بناتا ہے۔ یہ ڈارک فیلڈ امیجنگ طریقہ تصاویر کے تضاد کو بہتر بنا سکتا ہے اور یہ ایک اہم امیجنگ طریقہ ہے۔
تاریک فیلڈ امیجنگ حاصل کرنے کے لیے فلوروسینس مائیکروسکوپی کے لیے تقریباً چار طریقے ہیں: (1) مقصدی یپرچر کو حرکت دیتے ہوئے آپٹیکل محور کے ساتھ عمودی روشنی کو برقرار رکھنا؛ (2) آپٹیکل محور کی سمت میں بکھرے ہوئے شہتیروں کو حاصل کرنے کے لیے ترچھی روشنی کے استعمال کو سینٹر ڈارک فیلڈ امیجنگ (CDFI) کہا جاتا ہے۔ (3) ایک معروضی لینس کا یپرچر جس میں مرکزی بیم بلاکنگ اور ایک سرکلر شفاف علاقہ ہے۔ (4) روشنی کا پتہ لگانے کے لیے ایک سرکلر شفاف اسپاٹ لائٹ کا استعمال کریں اور مرکزی سرکلر ہول کے ساتھ ایک مقصدی یپرچر۔ یہاں کے * طریقے سادہ اور آسان ہیں، لیکن وہ دور آستین والے علاقے میں الیکٹرانک امیجنگ کا استعمال کرتے ہیں، جس کے نتیجے میں بڑی خرابیاں اور تصویر کا معیار خراب ہوتا ہے۔ دوسرا طریقہ مندرجہ بالا خرابیوں سے بچ سکتا ہے، لیکن لائیکا فلوروسینس مائکروسکوپ کا مقصدی یپرچر صرف بکھرے ہوئے الیکٹرانوں کا ایک چھوٹا سا حصہ حاصل کرتا ہے، جس کے نتیجے میں کارکردگی کم ہوتی ہے۔ یپرچر کی طرف اکثر الیکٹران کی ایک بڑی تعداد سے بمباری ہوتی ہے، جو آسانی سے غیر متناسب آلودگی کا سبب بن سکتی ہے اور تصویر کے معیار کو متاثر کر سکتی ہے۔ اس سلسلے میں سرکلر مقصد کو بہتر بنایا گیا ہے، لیکن نقصان یہ ہے کہ اسے بنانا مشکل ہے اور مکمل محوری توازن حاصل کرنا مشکل ہے۔ روشنی کے نظام کے لیے نسبتاً آرام دہ تقاضوں کو دیکھتے ہوئے، مؤخر الذکر حل کو اپنایا جا سکتا ہے، جس میں نمونے کے لیے کھوکھلی روشنی فراہم کرنے کے لیے کنڈینسر میں ایک سرکلر یپرچر شامل کرنا شامل ہے۔ اس ڈیوائس کا اثر۔ اس کی امیج ریزولوشن روشن فیلڈ امیجز کے قریب ہوسکتی ہے، جبکہ اس کے برعکس بہت بہتر ہے۔
