لیزر کنفوکل مائکروسکوپ آپریشن کا اصول
لیزر کنفوکل مائکروسکوپی فلوروسینس مائیکروسکوپ امیجنگ پر مبنی ہے جس میں لیزر اسکیننگ ڈیوائس کے اضافے، کمپیوٹر امیج پروسیسنگ کے استعمال، آپٹیکل امیجنگ کی ریزولوشن میں 30% - 40% اضافہ، الٹرا وائلٹ یا فلوروسینٹ کی نظر آنے والی روشنی کا استعمال تحقیقات، تاکہ خلیات یا بافتوں کے اندرونی مائیکرو اسٹرکچر کی فلوروسینس امیج حاصل کر سکیں، ذیلی خلوی سطح پر جسمانی سگنلز اور سیلولر مورفولوجی تبدیلیوں، جیسے Ca2+، PH، جھلی کی صلاحیت، وغیرہ کا مشاہدہ کرنے کے لیے، بن گیا ہے۔ مورفولوجی، سالماتی حیاتیات، نیورو سائنس، فارماکولوجی، جینیات اور دیگر شعبوں میں طاقتور تحقیقی ٹولز کی ایک نئی نسل۔ لیزر کنفوکل امیجنگ سسٹم مورفولوجی، مالیکیولر بائیولوجی، نیورو سائنس، فارماکولوجی، جینیات اور اسی طرح کے شعبوں میں تحقیقی ٹولز کی ایک طاقتور نئی نسل ہے۔ لیزر کنفوکل امیجنگ سسٹم کو مختلف قسم کے داغ دار، غیر داغدار اور فلوروسینٹ لیبل والے ٹشوز اور سیلز وغیرہ کا مشاہدہ کرنے کے لیے استعمال کیا جا سکتا ہے، Vivo میں ٹشو سیکشنز اور سیلز کی نشوونما اور نشوونما کا مشاہدہ اور مطالعہ کرنے کے لیے، اور انٹرا سیلولر کا مطالعہ اور پیمائش کرنے کے لیے۔ مادوں کی نقل و حمل اور توانائی کی تبدیلی۔ یہ زندہ خلیات (RATIO) میں آئن اور پی ایچ کی تبدیلیوں، نیورو ٹرانسمیٹر ریسرچ، تفریق مداخلت اور فلوروسینس ٹوموگرافی، ایک سے زیادہ فلوروسینس ٹوموگرافی اور اوورلیپ، فلوروسینس اسپیکٹروسکوپی تجزیہ کرنے کی صلاحیت رکھتا ہے، فلوروسینس اشارے کا فلوروسینس اشارے کا مقداری تجزیہ- وقت کے fluorescence نمونے کا تجزیہ۔ ٹشوز اور خلیات کی سہ جہتی متحرک ساخت کے تاخیری سکیننگ اور متحرک اجزاء، فلوروسینس گونج توانائی کی منتقلی کا تجزیہ، فلوروسینس ان سیٹو ہائبرڈائزیشن ریسرچ (FISH)، cytoskeletal Research (FISH)، اور cytoskeleton کا مطالعہ۔ FISH)، سائٹوسکلٹن ریسرچ، جین لوکلائزیشن ریسرچ، ان سیٹو ریئل ٹائم پی سی آر پروڈکٹ تجزیہ، فلوروسینس بلیچنگ ریکوری ریسرچ (FRAP)، انٹر سیلولر کمیونیکیشن ریسرچ، انٹر پروٹین ریسرچ، جھلی کی صلاحیت اور جھلی کی روانی پر تحقیق وغیرہ، مکمل کرنے کے لیے۔ تصویری تجزیہ اور سہ جہتی تعمیر نو اور دیگر تجزیوں کا تجزیہ۔
لیزر کنفوکل مائکروسکوپ سسٹم ایپلی کیشن کے علاقے:
طب، جانوروں اور پودوں کی سائنسی تحقیق، بائیو کیمسٹری، **الوجی، سیل بائیولوجی، ٹشو ایمبریو، فوڈ سائنس، جینیات، فارماکولوجی، فزیالوجی، آپٹکس، پیتھالوجی، نباتیات، نیورو سائنس، میرین بائیولوجی، میٹریل سائنس، الیکٹرانک سائنس، میکانکس، پیٹرولیم شامل ہیں۔ ارضیات، معدنیات.
بنیادی اصول
روایتی آپٹیکل مائکروسکوپ فیلڈ لائٹ سورس کا استعمال کرتی ہے، نمونے پر موجود ہر نقطہ کی تصویر میں پڑوسی پوائنٹس سے روشنی کے پھیلاؤ یا بکھرنے سے مداخلت کی جائے گی۔ لیزر کنفوکل مائیکروسکوپ نمونے کے فوکل ہول پر ہر ایک پوائنٹ کو اسکین کرنے کے لیے ایک نقطہ روشنی کا ذریعہ بنانے کے لیے روشن پن ہول کے ذریعے ایک لیزر بیم کا استعمال کرتا ہے، نمونے کے شعاع ریزی والے نقطہ کو پتہ لگانے والے پن ہول پر امیج کیا جائے گا، اور پھر اسے موصول کیا جائے گا۔ پوائنٹ ملٹیپلائنگ ٹیوب (پی ایم ٹی) یا کولڈ الیکٹروکوپلنگ ڈیوائس (سی سی سی ڈی) کے بعد پتہ لگانے کا پن ہول، پوائنٹ بائے پوائنٹ یا لائن بائے لائن، اور پھر کمپیوٹر مانیٹر پر تیزی سے ڈسپلے کیا جائے۔ پروب پنہول کے پیچھے PMT یا cCCD کے ذریعہ پوائنٹ بہ پوائنٹ یا لائن بہ لائن موصول ہونے سے، کمپیوٹر مانیٹر اسکرین پر فلوروسینٹ امیج تیزی سے بنتی ہے۔ الیومینیشن پن ہول اور ڈیٹیکشن پن ہول معروضی لینس کے فوکل طیارے کے حوالے سے جوڑتے ہیں، فوکل ہوائی جہاز کے پوائنٹس ایک ہی وقت میں الیومینیشن پن ہول اور ایمیشن پن ہول پر مرکوز ہوتے ہیں، اور فوکل ہوائی جہاز کے باہر کے پوائنٹس نہیں ہوتے۔ پتہ لگانے کے پن ہول پر تصویر بنائی جائے، تاکہ کنفوکل امیج نمونے کا ایک آپٹیکل کراس سیکشن ہو، جو عام خوردبین کی مبہم تصویر کے نقصان پر قابو پاتا ہے۔
لیزر کنفوکل مائکروسکوپ کام کرنے کا اصول
