بیکٹریا کا مشاہدہ آپٹیکل مائکروسکوپ کے ذریعے کیا جانا چاہیے۔
اشیاء کو میگنفائنگ اور مشاہدہ کرنے کے لیے ایک درست آلے کے طور پر، نظری خوردبین مختلف قسم کے نمونوں کا مشاہدہ کر سکتی ہے۔ مائکروبیل ریسرچ، پلانٹ ریسرچ، اور جانوروں کی تحقیق جیسی صنعتوں کے صارفین کو بیکٹیریل سائز کی سطح کو دیکھنے کی ضرورت ہے۔ لہذا، ایسے نمونوں کا مشاہدہ کرتے وقت، کس قسم کی خوردبین کا استعمال کیا جانا چاہئے؟ یہ مضمون ایک تفصیلی تجزیہ فراہم کرتا ہے۔
اس سوال کا جواب بیکٹیریا کے جسم کے سائز، انسانی آنکھ کی ریزولوشن اور خوردبین جیسے پہلوؤں سے زیر بحث لایا جا سکتا ہے۔
1. بیکٹیریل جسموں کا سائز عام طور پر مائکرو میٹر پیمانے پر ہوتا ہے، مثال کے طور پر Escherichia coli لیتے ہیں: لمبائی تقریباً 1um اور چوڑائی تقریباً 0.5um ہے۔
2. ریزولوشن سے مراد دو آبجیکٹ پوائنٹس کے درمیان چھوٹا فاصلہ ہے جسے واضح طور پر پہچانا جا سکتا ہے۔
مائکروسکوپ کی ریزولیوشن سے مراد دو آبجیکٹ پوائنٹس کے درمیان چھوٹا سا فاصلہ ہے جسے مائکروسکوپ کے ذریعے بڑا کرنے اور امیج کرنے کے بعد واضح طور پر پہچانا جا سکتا ہے۔
کسی آلے کی ریزولیوشن سے مراد ماپا آبجیکٹ کی مائیکرو اسٹرکچر کی معلومات فراہم کرنے کی صلاحیت ہے۔ ریزولوشن جتنی زیادہ ہوگی، اتنی ہی تفصیلی معلومات فراہم کی جائیں گی۔ ایمپلیفیکیشن کی حد سے آگے بڑھنے کو غلط ایمپلیفیکیشن کہا جاتا ہے، جو ساخت کے بارے میں مزید تفصیلی معلومات فراہم نہیں کر سکتا۔
3. انسانی آنکھ کی ریزولیوشن 0.1 ملی میٹر ہے، جس کا مطلب ہے کہ کافی روشنی اور 1 فٹ کی دوری کے تحت، انسانی آنکھ دو پوائنٹس کے درمیان کم از کم فاصلہ جو فرق کر سکتی ہے وہ ہے 0.1 ملی میٹر .
4. خلاصہ یہ کہ بیکٹیریا کی موجودگی کو دیکھنے کے لیے، میگنیفیکیشن کم از کم 0.1mm ÷ 0.5um=1000 ÷ 5=200 بار ہونا چاہیے۔ تاہم، اس میگنیفیکیشن میں، دیکھا جانے والا بیکٹیریا (Escherichia coli) صرف ایک چھوٹا سا نقطہ ہے، اور مزید تفصیلی ساختی معلومات دیکھنے کے لیے، خوردبین کی میگنیفیکیشن کو بڑھانا ضروری ہے۔
5. ایک عام نظری خوردبین کی ریزولیوشن نظر آنے والی روشنی کی طول موج (390-770nm) سے محدود ہوتی ہے اور عام طور پر 1000 گنا سے زیادہ نہیں ہوتی، جو کہ ایک عام نظری خوردبین کی وسعت کی حد ہے۔ 1000 گنا سے زیادہ اضافہ زیادہ تفصیلی ساختی معلومات فراہم نہیں کر سکتا، جو کہ غیر موثر امپلیفیکیشن کے دائرہ کار میں ہے۔
6. الیکٹران مائکروسکوپ کی میگنیفیکیشن 800000 گنا تک پہنچ سکتی ہے، اور اس کا بنیادی اصول ایک عام آپٹیکل مائکروسکوپ جیسا ہی ہے، جو ہائی پریشر کے ذریعے مختصر طول موج والی الیکٹران لہریں پیدا کرتا ہے۔
400 بار (10x، 40x) پر زوم کرنے سے، آپ بمشکل بیکٹیریا دیکھ سکتے ہیں، لیکن وہ صرف سوئی کی نوک کے سائز کے ہوتے ہیں، جیسے چھوٹے نقطے۔ عام طور پر، ہم اب بھی مشاہدے کے لیے 1000 بار (10x، 100x) میں زوم کرتے ہیں، اور اس وقت، فلاجیلا کے خاص داغ لگنے کے بعد بھی، بیکٹیریا کی ظاہری شکل اب بھی واضح طور پر دیکھی جا سکتی ہے۔ 1000 بار میگنفائنگ کے لیے آئل لینس کا استعمال درکار ہوتا ہے۔ نام نہاد آئل لینس سے مراد معروضی لینس اور کور گلاس کے درمیان دیودار کے تیل کا ایک قطرہ گرنا ہے۔ دیودار کے تیل کا ہلکا اضطراری انڈیکس ہوا کے مقابلے میں زیادہ ہوتا ہے، تاکہ ایک بڑا اضافہ استعمال کیا جا سکے۔
10x اور 40x اشارہ کرتے ہیں کہ لینس 10x اور 40x سے بڑھا ہوا ہے۔ اس خوردبین کی کل میگنیفیکیشن حاصل کرنے کے لیے آئی پیس کی میگنیفیکیشن کو مقصدی لینس کی میگنیفیکیشن سے ضرب دیا جاتا ہے۔ ہائی اسکول مائکروسکوپ کے آئی پیس اور مقصدی لینس کو تبدیل کیا جاسکتا ہے، اور آئی پیس عام طور پر 5x یا 10x ہوتی ہے۔ ایک چھوٹی خوردبین کی آئی پیس عام طور پر صرف 10x ہوتی ہے، اور اسے E. coli، Staphylococcus aureus، Bacillus subtilis، اور Bacillus megaterium (بیضوں کا مشاہدہ کرنے کے لیے استعمال کیا جاتا ہے) کے لیے جانچ پڑتال کی گئی ہے۔






