فلوروسینس مائکروسکوپ کے اصول اور ساختی خصوصیات
فلوروسینس مائیکروسکوپ ایک خاص طول موج (جیسے الٹرا وائلٹ لائٹ 3650 یا وایلیٹ بلیو لائٹ 4200) کے ساتھ رنگین فلٹر سسٹم کے ذریعے ایکسائٹیشن لائٹ کے ذریعے روشنی کے اخراج کے لیے اعلی برائٹ کارکردگی کے ساتھ ایک نقطہ کا استعمال کرتی ہے، اور پھر نمونے میں موجود فلوروسینٹ مادوں کو اخراج کرنے کے لیے پرجوش کرتی ہے۔ مختلف رنگوں کے ساتھ فلوروسینس، اور پھر معروضی لینس اور آئی پیس کے پروردن کے ذریعے ان کا مشاہدہ کرتا ہے۔ اس طرح، مضبوط کنٹراسٹ پس منظر کے تحت، یہاں تک کہ اگر فلوروسینس بہت کمزور ہے، اس کی شناخت کرنا آسان ہے اور اس کی حساسیت زیادہ ہے۔ یہ بنیادی طور پر سیل کی ساخت اور فنکشن اور کیمیائی ساخت کے مطالعہ کے لیے استعمال ہوتا ہے۔ فلوروسینس مائیکروسکوپ کا بنیادی ڈھانچہ عام آپٹیکل مائکروسکوپ اور کچھ لوازمات (جیسے فلوروسینٹ لائٹ سورس، ایکسائٹیشن فلٹر، ڈیکروک بیم اسپلٹر اور بلاکنگ فلٹر وغیرہ) پر مشتمل ہے۔ فلوروسینٹ روشنی کا منبع —— الٹرا ہائی پریشر مرکری لیمپ (50-200W) عام طور پر استعمال کیا جاتا ہے، جو مختلف طول موج کے ساتھ روشنی کا اخراج کر سکتا ہے، لیکن ہر فلوروسینٹ مادے میں ایک جوش والی روشنی کی طول موج ہوتی ہے جو مضبوط ترین فلوروسینس پیدا کرتی ہے، لہذا یہ ہے حوصلہ افزائی کے فلٹرز (عام طور پر بالائے بنفشی، جامنی، نیلے اور سبز جوش کے فلٹرز) کو شامل کرنے کے لیے ضروری ہے، تاکہ جوش کی روشنی کی صرف ایک مخصوص طول موج نمونے میں منتقل ہو، اور باقی تمام روشنی جذب ہو جائے۔ ہر مادہ کو جوش کی روشنی سے شعاع کرنے کے بعد، یہ بہت کم وقت میں شعاع ریزی کی طول موج سے زیادہ دیر تک دکھائی دینے والی فلوروسینس خارج کرتا ہے۔ فلوروسینس کی خاصیت ہے، جو عام طور پر جوش کی روشنی سے کمزور ہوتی ہے۔ مخصوص فلوروسینس کا مشاہدہ کرنے کے لیے، معروضی لینس کے پیچھے بلاک (یا دبانا) ضروری ہے اور ایک ساتھ استعمال کیا جانا چاہیے۔
فلوروسینس مائکروسکوپ اور عام خوردبین کے درمیان فرق
1. الیومینیشن موڈ عام طور پر ایپیسوڈک ہوتا ہے، یعنی روشنی کا منبع مقصدی لینس کے ذریعے نمونے پر پیش کیا جاتا ہے۔
2. روشنی کا منبع الٹرا وایلیٹ لائٹ ہے جس کی طول موج کم ہے اور عام خوردبین سے زیادہ ریزولوشن ہے۔
3. دو خاص فلٹرز ہیں، روشنی کے منبع کے سامنے والا ایک نظر آنے والی روشنی کو فلٹر کرنے کے لیے استعمال کیا جاتا ہے، اور آئی پیس اور آبجیکٹیو لینس کے درمیان والا ایک الٹرا وائلٹ روشنی کو فلٹر کرنے کے لیے لوگوں کی آنکھوں کی حفاظت کے لیے استعمال کیا جاتا ہے۔
فلوروسینس خوردبین بھی نظری خوردبین کی ایک قسم ہے، بنیادی فرق یہ ہے کہ ان کی اتیجیت طول موج مختلف ہوتی ہے۔ یہ ساخت اور استعمال میں فلوروسینس مائکروسکوپ اور عام آپٹیکل مائکروسکوپ کے درمیان فرق کا تعین کرتا ہے۔
فلوروسینس مائکروسکوپ امیونو فلوروسینس سائٹو کیمسٹری کا بنیادی ٹول ہے۔ یہ روشنی کا ذریعہ، فلٹر پلیٹ سسٹم اور آپٹیکل سسٹم پر مشتمل ہے۔ یہ ایک مخصوص طول موج کے ساتھ روشنی کا استعمال کرتا ہے تاکہ نمونے کو فلوروسینس کے اخراج کے لیے پرجوش کرے، اور نمونے کی فلوروسینس امیج کا مشاہدہ کرنے کے لیے معروضی لینس اور آئی پیس سسٹم کے ذریعے اس کو بڑھاتا ہے۔
