فلوروسینس مائکروسکوپی کے اصول اور ساختی خصوصیات
فلوروسینس مائیکروسکوپ نقطہ روشنی کے منبع کی ایک اعلی چمکیلی کارکردگی کا استعمال ہے، رنگین فلٹرنگ سسٹم کے ذریعے روشنی کی ایک خاص طول موج (جیسے الٹرا وایلیٹ 3650 یا وایلیٹ-بلیو 4200) کو جوش کی روشنی کے طور پر خارج کرنے کے لیے، فلوروسینٹ مواد کی جوش نمونہ فلوروسینس کے مختلف رنگوں کا اخراج کرتا ہے، اور پھر مشاہدے کے لیے مقصد اور آئی پیس کے ذریعے بڑھایا جاتا ہے۔ اس طرح، مضبوط کنٹراسٹ پس منظر میں، یہاں تک کہ اگر فلوروسینس بہت کمزور ہے، اس کی شناخت کرنا آسان ہے، اعلی حساسیت، بنیادی طور پر سیل کی ساخت اور فنکشن اور کیمیائی ساخت کے مطالعہ کے لیے استعمال ہوتی ہے۔ فلوروسینس مائیکروسکوپ کا بنیادی ڈھانچہ ایک عام آپٹیکل مائیکروسکوپ کے علاوہ کچھ لوازمات (جیسے فلوروسینس لائٹ سورس، ایکسائٹیشن فلٹرز، ڈوئل کلر بیم سیپریٹر اور بلاکنگ فلٹرز وغیرہ) پر مشتمل ہوتا ہے۔ فلوروسینٹ لائٹ ماخذ - عام طور پر انتہائی ہائی پریشر مرکری لیمپ (50-200W) کا استعمال کیا جاتا ہے، جو مختلف قسم کی روشنی کی طول موج کا اخراج کر سکتا ہے، لیکن ہر فلوروسینٹ مواد میں سب سے مضبوط فلوروسینٹ ایکسائٹیشن ویو لینتھ ہوتا ہے، اس لیے جوش کے فلٹرز کو شامل کرنے کی ضرورت ہوتی ہے (عام طور پر بالائے بنفشی، بنفشی، نیلے اور سبز اتیجیت فلٹر)، تاکہ نمونوں کی شعاع ریزی کے ذریعے صرف ایک مخصوص طول موج کی اتیجیت روشنی ہو، جبکہ دوسری روشنی جذب ہو جائے۔ لہذا یہ ضروری ہے کہ ایک اتیجیت فلٹر (عام طور پر بالائے بنفشی، بنفشی، نیلے اور سبز اتیجیت فلٹر) کو شامل کیا جائے، تاکہ نمونہ کے ذریعے صرف ایک مخصوص طول موج کی جوش کی روشنی ہو، جبکہ دیگر روشنی جذب ہو جائے۔ جب ہر مادہ کو جوش کی روشنی سے شعاع کیا جاتا ہے، تو یہ بہت ہی کم وقت میں شعاع ریزی والی روشنی کی نسبت طویل طول موج کا مرئی فلوروسینس خارج کرتا ہے۔ فلوروسینس کی ایک خاصیت ہوتی ہے، جو عام طور پر جوش کی روشنی سے کمزور ہوتی ہے، مخصوص فلوروسینس کا مشاہدہ کرنے کے لیے، بلاکنگ (یا دبانے) کے فلٹر کو شامل کرنے کی ضرورت کے پیچھے معروضی لینس میں۔
اس کا کردار دوگنا ہے:
ایک یہ ہے کہ جوش کی روشنی کو آئی پیس میں جذب اور روکنا ہے، تاکہ فلوروسینس اور آنکھ کو پہنچنے والے نقصان میں خلل نہ پڑے۔
دوسرا یہ ہے کہ مخصوص فلوروسینس کو منتخب کریں اور جانے دیں، ایک مخصوص فلوروسینٹ رنگ دکھا کر۔ دو قسم کے فلٹرز کو منتخب کیا جانا چاہیے اور مل کر استعمال کیا جانا چاہیے۔
