الیکٹران مائکروسکوپ اور ڈیجیٹل مائکروسکوپ کے درمیان فرق
"ڈیجیٹل مائیکروسکوپ" کی اصطلاح دراصل ڈیجیٹل امیجنگ آلات سے مراد ہے جو آپٹیکل مائیکروسکوپ کے ساتھ منسلک ہے اور مائیکروسکوپ کے ذریعے بنائی گئی تصویر کو براہ راست کمپیوٹر اسکرین پر دکھا سکتا ہے۔ یہ آپٹیکل مائکروسکوپ پر بنایا گیا ہے، اور الیکٹران مائکروسکوپ کے امیجنگ تصور کے ضروری کاموں کو استعمال کیا جاتا ہے۔ امتیاز ہمیں اس معاملے میں ریزولوشن اور میگنیفیکیشن کے درمیان فرق کرنا چاہیے۔ کسی چھوٹی شے کی تصویر کی اعلی ریزولیوشن جس کو زوم ان کیا گیا ہے منعکس روشنی کی لہر کی طول موج پر انحصار کرتا ہے۔ طول موج کم ہونے کے ساتھ ہی ریزولوشن بڑھتا ہے۔ اگرچہ روایتی "ڈیجیٹل خوردبین" میں بہت زیادہ اضافہ ہو سکتا ہے، ریزولوشن کو بڑھایا نہیں جا سکتا، الیکٹران خوردبین ایکس رے امیجنگ کا استعمال کرتی ہے جس کی طول موج عام نظر آنے والی روشنی سے کافی کم ہوتی ہے، یقیناً، اور اس کی ریزولوشن بہت زیادہ ہوتی ہے۔
روشنی کی لہر کی طول موج آپٹیکل مائکروسکوپ کی ریزولوشن کو متاثر کرتی ہے۔ نظری خوردبین روشنی کی طول موج کے قریب یا اس سے چھوٹی چیزوں کا پتہ لگانے سے قاصر ہے۔ چھوٹی چیزوں کو دیکھا جا سکتا ہے کیونکہ الیکٹران کی حرکت کی طول موج روشنی کی لہر کی طول موج سے کافی کم ہوتی ہے۔ ایک الیکٹران خوردبین نظر آنے والی روشنی کی جگہ الیکٹران کے بہاؤ، عینک کی جگہ مقناطیسی میدان، اور فوٹون کی جگہ الیکٹران کی حرکت کا استعمال کرتی ہے تاکہ ان چیزوں کو دیکھنے کے لیے جو نظری نظام کے ذریعے دیکھی جا سکتی ہیں ان سے چھوٹی ہیں۔ آپٹیکل مائکروسکوپ ایک میگنیفائیڈ امیجنگ سسٹم ہے جو آپٹیکل لینز کے سیٹ سے بنا ہے۔
ایک نظری خوردبین چھوٹی اشیاء کی ایک بڑی تصویر بنانے کے لیے مرئی روشنی کی روشنی کا استعمال کرتا ہے، جب کہ الیکٹران مائکروسکوپ ایک بڑے پیمانے کا آلہ ہے جو الیکٹران کے بہاؤ کی منتقلی یا عکاسی کے ذریعے فلوروسینٹ اسکرین پر تصاویر بنانے کے لیے الیکٹران بیم کو روشنی کے ذریعہ کے طور پر استعمال کرتا ہے۔ نمونے پر اور برقی مقناطیسی لینس کے ملٹی اسٹیج میگنیفیکیشن پر۔ آخر میں، مندرجہ ذیل خصوصیات الیکٹران خوردبین کو نظری خوردبین سے الگ کرتی ہیں:
1. روشنی کے مختلف ذرائع الیکٹران کینن سے خارج ہونے والا الیکٹران کا بہاؤ الیکٹران خوردبین کے لیے روشنی کے ذریعہ کے طور پر کام کرتا ہے، جب کہ مرئی روشنی روشنی خوردبین (سورج کی روشنی یا روشنی) کے لیے روشنی کے ذریعہ کے طور پر کام کرتی ہے۔ الیکٹران خوردبین کی میگنیفیکیشن اور ریزولیوشن روشنی خوردبین کے مقابلے میں کافی زیادہ ہے کیونکہ الیکٹران کے بہاؤ کی طول موج روشنی کی لہر سے بہت کم ہے۔
2. مختلف لینسز جہاں روشنی خوردبین کا معروضی لینس شیشے سے بنا ایک آپٹیکل لینس ہے، الیکٹران مائکروسکوپ کا میگنفائنگ آبجیکٹو لینس ایک برقی لینس ہے (ایک کنڈلی برقی مقناطیسی کنڈلی جو مرکزی علاقے میں مقناطیسی میدان پیدا کر سکتی ہے)۔ روشنی خوردبین کے کنڈینسر لینس، معروضی لینس، اور آئی پیس کے افعال الیکٹران مائکروسکوپ میں برقی مقناطیسی لینز کے تین گروپوں کے مشابہ ہیں۔
3. ایک مختلف امیجنگ اصول استعمال کیا جاتا ہے. الیکٹران مائکروسکوپ کا برقی مقناطیسی لینس ایک الیکٹران بیم کو بڑھاتا ہے جو نمونے پر کام کر رہا ہے اس سے پہلے کہ اسے فلوروسینٹ اسکرین یا فوٹو حساس فلم پر امیج کیا جاسکے۔ جب الیکٹران بیم ٹیسٹ کے تحت نمونے پر حملہ کرتا ہے، تو واقعہ الیکٹران مادہ کے ایٹموں سے ٹکراتے ہیں تاکہ بکھرنے کا عمل پیدا ہو، جو الیکٹران کی کثافت میں تغیر کا طریقہ کار ہے۔ نمونے کی الیکٹران تصویر کو رنگوں میں دیا گیا ہے کیونکہ نمونے کے مختلف حصے الیکٹران کو مختلف شرحوں پر بکھرتے ہیں۔ نمونے کی آبجیکٹ تصویر روشنی کی خوردبین میں چمک میں فرق کے طور پر ظاہر ہوتی ہے، جو روشنی کی مقدار میں تغیر کے باعث سامنے آتی ہے۔ امتحان کے تحت نمونے کے مختلف ڈھانچے کے ذریعہ تیار کیا گیا ہے۔
4. نمونے کی تیاری کے لیے مختلف تکنیکیں استعمال کی جاتی ہیں۔ الیکٹران خوردبین کے نیچے دیکھنے کے لیے ٹشو سیل کے نمونوں کی تیاری میں تکنیکی مشکلات اور لاگت دونوں اہم ہیں۔ مواد جمع کرنا، طے کرنا، پانی کی کمی، اور سرایت کرنا ایسے اقدامات ہیں جو خصوصی کیمیکلز اور طریقہ کار کا مطالبہ کرتے ہیں۔ جڑے ہوئے ٹشو بلاکس کو بعد میں الٹرا مائیکروٹوم کا استعمال کرتے ہوئے انتہائی پتلی نمونہ کے ٹکڑوں میں کاٹا جانا چاہیے جس کی موٹائی 50-100 nm ہو۔ ہلکے مائیکروسکوپی نمونے، جیسے کہ ٹشو سلائس کے باقاعدہ نمونے، سیل سمیر کے نمونے، ٹشو کمپریشن کے نمونے، اور سیل ڈراپ کے نمونے، عام طور پر شیشے کی سلائیڈوں پر نصب ہوتے ہیں۔
