فلوروسینس مائکروسکوپ کے بنیادی اور ساختی عناصر
فلوروسینس مائیکروسکوپی فلٹر سسٹم کے ذریعے کسی خاص طول موج (جیسے الٹرا وائلٹ لائٹ 3650 انچ یا ارغوانی نیلی روشنی 4200 انچ) کی روشنی کو خارج کرنے کے لیے اعلیٰ برائٹ کارکردگی کے ساتھ ایک نقطہ کا استعمال کرتی ہے جیسا کہ fluorescence کے نمونے میں موجود فلوروسینٹ مادوں کو پرجوش کرنے کے لیے جوش کی روشنی۔ مختلف رنگ اس کے بعد معروضی لینس اور آئی پیس کی میگنیفیکیشن کے ذریعے مشاہدہ کریں۔ اس طرح، ایک مضبوط کنٹراسٹ پس منظر کے تحت، یہاں تک کہ اگر فلوروسینس بہت کمزور ہے، اس کی شناخت کرنا آسان ہے اور اس میں حساسیت زیادہ ہے۔ یہ بنیادی طور پر سیل کی ساخت اور فنکشن اور کیمیائی ساخت کی تحقیق کے لیے استعمال ہوتا ہے۔ فلوروسینس مائیکروسکوپ کا بنیادی ڈھانچہ ایک عام آپٹیکل مائیکروسکوپ کے علاوہ کچھ لوازمات (جیسے فلوروسینٹ لائٹ سورس، ایک ایکسائٹیشن فلٹر، دو رنگوں کا بیم سپلٹر اور بلاک کرنے والا فلٹر وغیرہ) پر مشتمل ہوتا ہے۔ فلوروسینٹ لائٹ ماخذ — عام طور پر انتہائی ہائی پریشر مرکری لیمپ (50-200W) کا استعمال کرتے ہیں، جو مختلف طول موجوں کی روشنی کو خارج کر سکتا ہے، لیکن ہر فلوروسینٹ مادہ کی ایک اتیجیت طول موج ہوتی ہے جو سب سے مضبوط فلوروسینس پیدا کرتی ہے، اس لیے ایک ایکسائٹیشن فلٹر (عام طور پر، بالائے بنفشی، جامنی، نیلے اور سبز اتیجیت کے فلٹرز ہیں)، جو صرف ایک مخصوص طول موج کی اتیجیت روشنی کو گزرنے دیتے ہیں اور نمونے کو روشن کرتے ہیں، جبکہ دوسری روشنی کو جذب کرتے ہیں۔ ہر مادہ کو جوش کی روشنی سے شعاع کرنے کے بعد، یہ بہت ہی کم وقت میں شعاع ریزی کی طول موج سے زیادہ لمبی طول موج کے ساتھ مرئی فلوروسینس خارج کرتا ہے۔ فلوروسینس مخصوص اور عام طور پر جوش کی روشنی سے کمزور ہے۔ مخصوص فلوروسینس کا مشاہدہ کرنے کے لیے، معروضی لینس کے پیچھے بلاکنگ (یا دبانے) کو شامل کرنا چاہیے اور اس کے ساتھ مل کر استعمال کرنا چاہیے۔
فلوروسینس مائکروسکوپ اور عام خوردبین کے درمیان فرق
1. روشنی کا طریقہ عام طور پر ایپسکوپک ہوتا ہے، یعنی روشنی کا منبع معروضی عینک کے ذریعے نمونے پر پیش کیا جاتا ہے۔
2. روشنی کا منبع بالائے بنفشی روشنی ہے، طول موج کم ہے، اور ریزولوشن عام خوردبینوں سے زیادہ ہے۔
3. دو خاص فلٹرز ہیں، روشنی کے منبع کے سامنے والا ایک نظر آنے والی روشنی کو فلٹر کرنے کے لیے استعمال کیا جاتا ہے، اور آئی پیس اور آبجیکٹیو لینس کے درمیان والا ایک انسانی آنکھ کی حفاظت کے لیے الٹرا وائلٹ شعاعوں کو فلٹر کرنے کے لیے استعمال کیا جاتا ہے۔
فلوروسینس مائکروسکوپ بھی ایک قسم کی نظری خوردبین ہے، بنیادی فرق یہ ہے کہ دونوں کی اتیجیت طول موج مختلف ہے۔ یہ ساخت اور استعمال کے لحاظ سے فلوروسینس مائکروسکوپ اور عام آپٹیکل مائکروسکوپ کے درمیان فرق کا تعین کرتا ہے۔
امیونو فلوروسینٹ سائٹو کیمسٹری میں فلوروسینس مائکروسکوپی ایک ضروری ٹول ہے۔ یہ اہم اجزاء پر مشتمل ہے جیسے روشنی کا ذریعہ، فلٹر پلیٹ سسٹم اور آپٹیکل سسٹم۔ یہ روشنی کی ایک مخصوص طول موج کا استعمال کرتے ہوئے نمونہ کو فلوروسینس کے اخراج کے لیے پرجوش کرنے کے لیے ہے، اور معروضی لینس اور آئی پیس سسٹم کو بڑھا کر نمونے کی فلوروسینس امیج کا مشاہدہ کرنا ہے۔
