فلوروسینس مائکروسکوپی کے اصول اور ساختی خصوصیات
فلوروسینس مائیکروسکوپی ایک خاص طول موج (جیسے الٹرا وائلٹ لائٹ 3650 انچ یا وایلیٹ بلیو لائٹ 4200 انچ) کو جوش کی روشنی کے طور پر رنگین فلٹرنگ سسٹم کے ذریعے خارج کرنے کے لیے اعلی برائٹ کارکردگی کے ساتھ ایک نقطہ کا استعمال کرتی ہے، اور نمونے میں موجود فلوروسینٹ مادوں کو مختلف قسم کے اخراج کے لیے اکساتی ہے۔ فلوروسینس کے رنگ اس کے بعد، مقصدی لینس اور آئی پیس کی میگنیفیکیشن کے ذریعے اس کا مشاہدہ کیا جاتا ہے۔ اس طرح، اس وقت بھی پہچاننا آسان ہے جب فلوروسینس مضبوط پس منظر کے خلاف بہت کمزور ہو، اعلی حساسیت کے ساتھ۔ یہ بنیادی طور پر سیل کی ساخت اور فنکشن کے ساتھ ساتھ کیمیائی ساخت کے مطالعہ کے لیے استعمال ہوتا ہے۔ فلوروسینس مائیکروسکوپ کا بنیادی ڈھانچہ ایک عام آپٹیکل مائکروسکوپ کے علاوہ لوازمات جیسے فلوروسینٹ لائٹ سورس، ایکسائٹیشن فلٹر، ڈیکروک بیم سیپریٹر، اور بلاکنگ فلٹر پر مشتمل ہوتا ہے۔ فلوروسینٹ روشنی کے ذرائع عام طور پر الٹرا ہائی پریشر مرکری لیمپ (50-200W) استعمال کرتے ہیں، جو مختلف طول موج کی روشنی کو خارج کر سکتے ہیں۔ تاہم، ہر فلوروسینٹ مادے میں ایک جوش والی روشنی کی طول موج ہوتی ہے جو سب سے مضبوط فلوروسینس پیدا کرتی ہے، اس لیے اتیجیت کے فلٹرز (عام طور پر الٹرا وایلیٹ، پرپل، بلیو اور گرین ایکسائٹیشن فلٹرز) کو شامل کرنے کی ضرورت ہوتی ہے تاکہ اتیجیت روشنی کی صرف ایک مخصوص طول موج کو گھسنے اور شعاع کرنے کی اجازت دی جا سکے۔ نمونہ، دیگر تمام روشنی جذب کرتے ہوئے. جوش کی روشنی سے شعاع ریزی ہونے کے بعد، ہر مادہ بہت ہی کم وقت میں شعاع ریزی کی طول موج سے زیادہ دیر تک دکھائی دینے والی فلوروسینس خارج کرتا ہے۔ فلوروسینس کی خصوصیت ہے اور یہ عام طور پر جوش کی روشنی سے کمزور ہے۔ مخصوص فلوروسینس کا مشاہدہ کرنے کے لیے، معروضی لینس کے پیچھے بلاکنگ (یا دبانے) کو شامل کرنا اور اسے ملا کر استعمال کرنا ضروری ہے۔
فلوروسینس مائکروسکوپ اور عام خوردبین کے درمیان فرق
1. روشنی کا طریقہ عام طور پر گرتی ہوئی بیم کی قسم ہے، جس میں روشنی کے منبع کو ایک معروضی لینس کے ذریعے نمونے پر پیش کیا جاتا ہے۔
2. روشنی کا منبع بالائے بنفشی روشنی ہے، جس کی طول موج کم ہے اور عام خوردبین سے زیادہ ریزولوشن ہے۔
3. دو خاص فلٹرز ہیں، روشنی کے منبع کے سامنے والا ایک نظر آنے والی روشنی کو فلٹر کرنے کے لیے استعمال کیا جاتا ہے، اور آئی پیس اور معروضی لینس کے درمیان والا ایک انسانی آنکھ کی حفاظت کے لیے بالائے بنفشی شعاعوں کو فلٹر کرنے کے لیے استعمال کیا جاتا ہے۔
فلوروسینس مائیکروسکوپی بھی ایک قسم کی آپٹیکل مائیکروسکوپی ہے، جس کا بنیادی فرق مختلف اتیجیت طول موج کا ہے۔ یہ فلوروسینٹ مائکروسکوپی اور عام آپٹیکل مائکروسکوپی کے درمیان ساخت اور استعمال میں فرق کا تعین کرتا ہے۔
فلوروسینس مائکروسکوپی امیونو فلوروسینس سائٹو کیمسٹری کا ایک بنیادی ٹول ہے۔ یہ اہم اجزاء پر مشتمل ہے جیسے روشنی کا ذریعہ، ایک فلٹر پلیٹ سسٹم، اور ایک نظری نظام۔ یہ روشنی کی ایک مخصوص طول موج کا استعمال کرتے ہوئے نمونے کو فلوروسینس کے اخراج کے لیے پرجوش کرتا ہے، اور نمونے کی فلوروسینس امیج کا مشاہدہ کرنے کے لیے اسے معروضی لینس اور آئی پیس سسٹم کے ذریعے بڑھاتا ہے۔
