ان کے نظری راستے کی بنیاد پر فلوروسینس خوردبین کی دو قسمیں ہیں:
1. ٹرانسمیشن فلوروسینس مائیکروسکوپ: ایکسائٹیشن لائٹ ماخذ نمونہ مواد کے ذریعے ایک کنڈینسر کے ذریعے فلوروسینس کو اکسانے کے لیے منتقل کیا جاتا ہے۔ عام طور پر استعمال ہونے والے ڈارک فیلڈ لائٹ کلیکٹرز، یا عام لائٹ کلیکٹرز کو ریفلیکٹر کو ایڈجسٹ کرنے کے لیے استعمال کیا جا سکتا ہے تاکہ جوش کی روشنی اور سائیڈ لائٹ کو نمونے میں تبدیل کیا جا سکے۔ یہ نسبتاً پرانے زمانے کا فلوروسینس خوردبین ہے۔ اس کا فائدہ یہ ہے کہ فلوروسینس کم میگنیفیکیشن پر مضبوط ہے، جبکہ اس کا نقصان یہ ہے کہ میگنیفیکیشن بڑھنے پر فلوروسینس کمزور ہو جاتا ہے۔ لہذا، یہ بڑے نمونہ مواد کا مشاہدہ کرنے کے لئے بہتر ہے.
2. گرنے والی بیم فلوروسینس مائکروسکوپ یہ جدید دور میں تیار کی گئی فلوروسینس مائکروسکوپ کی ایک نئی قسم ہے۔ پچھلی روشنی کے برعکس، جوش کی روشنی معروضی لینس سے نمونے کی سطح پر گرتی ہے، اسی مقصدی لینس کا استعمال کرتے ہوئے جیسے الیومینیشن کمڈینسر اور فلوروسینس کو جمع کرنے کے لیے مقصدی لینس۔ آپٹیکل پاتھ میں دوہری رنگ کے بیم کو الگ کرنے والے کو شامل کرنے کی ضرورت ہے، جو ہلکے یورینیم کے 45 ڈگری کے زاویے پر ہے۔ جوش کی روشنی معروضی لینس میں منعکس ہوتی ہے اور نمونے پر مرکوز ہوتی ہے۔ نمونے سے پیدا ہونے والا فلوروسینس، نیز معروضی لینس اور کور شیشے کی سطح سے منعکس ہونے والی اتیجیت روشنی، بیک وقت معروضی لینس میں داخل ہوتی ہے اور اتیجیت اور فلوروسینس کو الگ کرتے ہوئے، ڈیکروک بیم سیپریٹر پر واپس آتی ہے۔ اس کے بعد بقایا جوش کو بلاک کرنے والے فلٹر کے ذریعے جذب کیا جاتا ہے۔ اگر مختلف ایکسائٹیشن فلٹرز/ڈول کلر بیم سیپریٹرز/بلاکنگ فلٹر کے امتزاج کا استعمال کیا جائے تو وہ مختلف فلوروسینٹ ری ایکشن مصنوعات کی ضروریات کو پورا کر سکتے ہیں۔ اس فلوروسینٹ مائکروسکوپ کا فائدہ یہ ہے کہ بصارت کی روشنی کا میدان یکساں ہے، امیجنگ واضح ہے، اور جتنی بڑی میگنیفیکیشن ہوگی، فلوروسینس اتنا ہی مضبوط ہوگا۔
(2) فلوروسینس مائکروسکوپ کا استعمال
1. روشنی کا منبع آن کریں، اور انتہائی ہائی پریشر مرکری لیمپ کو اپنی چوٹی تک پہنچنے کے لیے چند منٹوں کے لیے پہلے سے گرم کرنے کی ضرورت ہے۔
2. ٹرانسمیشن فلوروسینس مائیکروسکوپ کے لیے لیمپ کے منبع اور کنڈینسر کے درمیان مطلوبہ ایکسائٹیشن فلٹر نصب کرنے کی ضرورت ہوتی ہے، اور اس سے متعلقہ بلاکنگ فلٹر کو مقصدی لینس کے پیچھے نصب کرنا ہوتا ہے۔ گرنے والی بیم فلوروسینس مائکروسکوپ کو آپٹیکل پاتھ کے سلاٹ میں مطلوبہ ایکسائٹیشن فلٹر/ڈول کلر بیم سیپریٹر/بلاکنگ فلٹر بلاک داخل کرنے کی ضرورت ہے۔
3. کم طاقت والے خوردبین کے ساتھ مشاہدہ کریں اور روشنی کے منبع کے مرکز کو فلوروسینس مائکروسکوپ کے مختلف ماڈلز کے ایڈجسٹمنٹ آلات کے مطابق ایڈجسٹ کریں، تاکہ یہ پوری روشنی کی جگہ کے مرکز میں واقع ہو۔
4. نمونے کے ٹکڑوں کو رکھیں اور مشاہدہ کرنے پر توجہ دیں۔ استعمال کے دوران، یہ یاد رکھنا چاہیے کہ حتمی فلٹر آنکھوں کے ساتھ براہ راست نہیں دیکھا جانا چاہئے تاکہ آنکھوں کو نقصان پہنچے؛ تیل کی خوردبین کے ساتھ نمونوں کا مشاہدہ کرتے وقت، ایک خاص غیر فلوروسینٹ تیل خوردبین کا استعمال کیا جانا چاہئے؛ ہائی پریشر مرکری لیمپ کے بند ہونے کے بعد، اسے فوری طور پر دوبارہ آن نہیں کیا جا سکتا۔ اسے دوبارہ شروع ہونے میں 5 منٹ لگیں گے، ورنہ یہ غیر مستحکم ہوگا اور مرکری لیمپ کی عمر کو متاثر کرے گا۔
（3） نیلے جامنی رنگ کی روشنی کے فلٹر کا استعمال کرتے ہوئے تدریسی پلیٹ فارم پر فلوروسینس مائکروسکوپ کے نیچے مشاہدہ کرتے ہوئے، یہ دیکھا جا سکتا ہے کہ خلیات 0.01 فیصد ایکریڈائن اورنج فلوروسینٹ ڈائی سے داغے ہوئے ہیں، نیوکلئس اور سائٹوپلازم دو مختلف پیدا کرنے کے لیے متحرک ہیں۔ فلوروسینس کے رنگ (گہرا سبز اور نارنجی سرخ)۔
