فلوروسینس مائکروسکوپ اور الٹی مائکروسکوپ میں کیا فرق ہے؟
خوردبین سیل کلچر اور متعلقہ مشتق تجربات میں ایک اہم آلہ ہے۔ اس وقت مارکیٹ میں مختلف قسم کے خوردبین موجود ہیں۔ ایسی خوردبین کا انتخاب کرنا ایک چیلنج ہے جو آپ کی ضروریات کو پورا کرتا ہو اور موزوں ہو۔ درج ذیل میں الٹی خوردبین اور فلوروسینس خوردبین کے اصول متعارف کرائے گئے ہیں، تاکہ آپ آسانی سے انتخاب کر سکیں۔
ایک الٹی خوردبین کی ساخت ایک عام خوردبین کی طرح ہے، اور اس میں بنیادی طور پر تین حصے شامل ہیں: ایک مکینیکل حصہ، ایک روشنی کا حصہ، اور ایک نظری حصہ۔
الٹی خوردبین کی ساخت ایک عام سیدھی خوردبین کی طرح ہی ہے، سوائے اس کے کہ معروضی لینس اور روشنی کا نظام الٹ جائے، سابقہ اسٹیج کے نیچے ہے اور مؤخر الذکر اسٹیج کے اوپر ہے۔
یہ ڈھانچہ روشنی کے ارتکاز کے نظام اور اسٹیج کے درمیان موثر فاصلے کو نمایاں طور پر پھیلانے کے قابل بناتا ہے، جو کہ موٹی چیزوں کو دیکھنے کے لیے موزوں ہے جیسے پیٹری ڈشز اور سیل کلچر فلاسکس (یقیناً، شیشے کی سلائیڈیں بھی قابل قبول ہیں)۔ ان کے درمیان کام کا فاصلہ بہت بڑا نہیں ہونا چاہیے۔
الٹی خوردبین کو طبی اور صحت کے یونٹوں، کالجوں اور یونیورسٹیوں اور تحقیقی اداروں میں مائکروجنزموں، خلیات، بیکٹیریا، ٹشو کلچر، سسپنشن، تلچھٹ وغیرہ کے مشاہدے کے لیے استعمال کیا جاتا ہے۔ یہ کلچر میڈیم میں خلیات اور بیکٹیریا کی تولید اور تقسیم کے عمل کا مسلسل مشاہدہ کر سکتا ہے، اور اس عمل کی کسی بھی شکل کی تصویر کشی کر سکتا ہے۔
یہ بڑے پیمانے پر سائٹولوجی، پیراسیٹولوجی، آنکولوجی، امیونولوجی، جینیاتی انجینئرنگ، صنعتی مائکرو بایولوجی، نباتیات اور دیگر شعبوں میں استعمال ہوتا ہے۔
فلوروسینس مائکروسکوپی کا استعمال خلیوں میں کیمیائی مادوں کے جذب، نقل و حمل، تقسیم اور لوکلائزیشن کا مطالعہ کرنے کے لیے کیا جاتا ہے۔
شے کا معائنہ کرنے کے لیے، فلوروسینس پیدا کرنے کے دو طریقے ہیں: آٹو فلوروسینس، جو الٹرا وائلٹ شعاع ریزی کے بعد براہ راست فلوروسینس خارج کرتا ہے۔ ثانوی فلوروسینس، جو مشاہدہ کی جانے والی چیز کے بعد فلوروسینٹ کا اخراج کر سکتا ہے فلوروسینٹ رنگوں سے علاج کیا جاتا ہے اور پھر الٹرا وایلیٹ روشنی سے شعاع کیا جاتا ہے۔
خلیات میں کچھ مادے، جیسے کہ کلوروفیل، الٹرا وایلیٹ شعاعوں سے شعاع ہونے کے بعد آٹو فلوروسینس پیدا کرتے ہیں۔ کچھ مادے خود سے فلوروسینٹ نہیں ہوسکتے ہیں، لیکن اگر وہ فلوروسینٹ رنگوں یا فلوروسینٹ اینٹی باڈیز سے داغے ہوئے ہیں، تو وہ الٹرا وایلیٹ شعاعوں سے شعاع ہونے کے بعد ثانوی فلوروسینس بھی خارج کرسکتے ہیں۔
فلوروسینس مائیکروسکوپ اعلی برائٹ کارکردگی کے ساتھ ایک نقطہ روشنی کا ذریعہ استعمال کرتا ہے، اور ایک مخصوص طول موج (الٹرا وائلٹ لائٹ 365nm یا وایلیٹ بلیو لائٹ 420nm) کی روشنی کو کلر فلٹر سسٹم کے ذریعے ایکسائٹیشن لائٹ کے طور پر خارج کرتا ہے، نمونے میں موجود فلوروسینٹ مادوں کو پرجوش کرنے کے بعد۔ فلوروسینس کے مختلف رنگ، اور پھر مقصد اور آئی پیسز کی میگنیفیکیشن کے ذریعے مشاہدہ کریں۔
مضبوط کنٹراسٹ پس منظر کے تحت، یہاں تک کہ اگر فلوروسینس بہت کمزور ہے، اس کی شناخت کرنا آسان ہے اور اس میں حساسیت زیادہ ہے۔ یہ بنیادی طور پر سیل کی ساخت اور فنکشن اور کیمیائی ساخت کے مطالعہ کے لیے استعمال ہوتا ہے۔
