بیکٹیریا کو دیکھنے کے لیے کس قسم کی خوردبین کا استعمال کیا جانا چاہیے؟
آپٹیکل خوردبین اشیاء کو میگنفائنگ اور مشاہدہ کرنے کا ایک درست آلہ ہے۔ مختلف نظری خوردبین مختلف قسم کے نمونوں کا مشاہدہ کر سکتی ہیں۔ مائکروبیل ریسرچ، پلانٹ ریسرچ، اور جانوروں کی تحقیق جیسی صنعتوں کے صارفین کو بیکٹیریل سائز کی سطح کو دیکھنے کی ضرورت ہے۔ نمونے چھانٹتے وقت کس قسم کی خوردبین استعمال کی جانی چاہیے اس مضمون میں تفصیل سے تجزیہ کیا گیا ہے۔
اس سوال کا جواب بیکٹیریا کی جسامت، انسانی آنکھوں اور خوردبینوں کی ریزولوشن وغیرہ کے حوالے سے زیر بحث لایا جا سکتا ہے۔
1. بیکٹیریا کے سیل کا سائز عام طور پر مائکرون کی سطح پر ہوتا ہے۔ Escherichia coli کو مثال کے طور پر لیں: لمبائی تقریباً 1um ہے اور چوڑائی تقریباً 0.5um ہے۔
2. ریزولوشن سے مراد دو آبجیکٹ پوائنٹس کے درمیان کم از کم فاصلہ ہے جسے واضح طور پر پہچانا جا سکتا ہے۔
خوردبین کی ریزولیوشن سے مراد دو آبجیکٹ پوائنٹس کے درمیان کم از کم فاصلہ ہے جسے مائکروسکوپ کے تصویر پر زوم کرنے کے بعد واضح طور پر پہچانا جا سکتا ہے۔
آلے کی ریزولیوشن سے مراد ماپا آبجیکٹ کی مائیکرو اسٹرکچر کی معلومات فراہم کرنے کے لیے آلے کی صلاحیت ہے۔ ریزولوشن جتنی زیادہ ہوگی، اتنی ہی تفصیلی معلومات فراہم کی جائیں گی۔ میگنیفیکیشن کی حد سے آگے بڑھنے کو غلط میگنیفیکیشن کہا جاتا ہے، اور غلط میگنیفکیشن ساخت کی مزید تفصیلی معلومات فراہم نہیں کر سکتی۔
3. انسانی آنکھ کی ریزولیوشن 0.1 ملی میٹر ہے، یعنی کافی روشنی اور 1 فٹ کے فاصلے کی حالت میں، دو پوائنٹس کے درمیان کم از کم فاصلہ جسے عام انسانی آنکھ فرق کر سکتی ہے {{4 }}.1 ملی میٹر۔
4. خلاصہ: بیکٹیریا کے وجود کو دیکھنے کے لیے، میگنیفیکیشن کم از کم: 0.1mm ÷ 0.5um=1000 ÷ 5=200 بار ہونا چاہیے۔ تاہم، اس میگنیفیکیشن میں، بیکٹریا (Escherichia coli) نظر آنے والا صرف ایک چھوٹا سا مقام ہے۔ اس کی باریک ساختی معلومات کو دیکھنے کے لیے، خوردبین کی میگنیفیکیشن کو بڑھانا ضروری ہے۔
5. عام نظری خوردبین کی ریزولیوشن نظر آنے والی روشنی کی طول موج (390~770nm،) سے محدود ہوتی ہے، عام طور پر 1000 گنا سے زیادہ نہیں ہوتی، جو کہ عام نظری خوردبینوں کی بہت بڑی قدر ہے۔ 1000 بار سے زیادہ کی میگنیفیکیشن بہتر ساختی معلومات فراہم نہیں کر سکتی، جو کہ غلط میگنیفیکیشن کی حد سے تعلق رکھتی ہے۔
6. الیکٹران مائکروسکوپ کی میگنیفیکیشن 800،000 بار تک پہنچ سکتی ہے۔ اس کا بنیادی اصول عام آپٹیکل مائیکروسکوپ جیسا ہی ہے جو کہ ہائی وولٹیج کے ذریعے مختصر طول موج الیکٹران لہریں پیدا کرنا ہے۔
جب 400 بار (10x، 40x) بڑھایا جائے تو، بیکٹیریا بمشکل دیکھے جا سکتے ہیں، لیکن صرف سوئی کی نوک کا سائز، جیسے چھوٹے نقطے۔ عام طور پر، ہم اب بھی مشاہدہ کرنے کے لیے 1000 گنا (10x، 100x) تک بڑھاتے ہیں۔ اس وقت، بیکٹیریا کی ظاہری شکل اب بھی واضح طور پر دیکھی جا سکتی ہے، اور فلاجیلا کو خصوصی رنگنے کے بعد بھی واضح طور پر دیکھا جا سکتا ہے۔ 1000 بار بڑا کرنے کے لیے، آپ کو آئل لینس استعمال کرنے کی ضرورت ہے۔ نام نہاد آئل لینس مقصد لینس اور کور گلاس کے درمیان دیودار کے تیل کا ایک قطرہ گرانا ہے۔ دیودار کے تیل کا لائٹ ریفریکشن انڈیکس ہوا کی نسبت زیادہ ہے، تاکہ ایک بڑا میگنیفیکیشن استعمال کیا جا سکے۔
10x اور 40x اشارہ کرتے ہیں کہ لینس 10 بار اور 40 گنا بڑھا ہوا ہے۔ خوردبین کی کل میگنیفیکیشن حاصل کرنے کے لیے آئی پیس کی میگنیفیکیشن کو مقصد کی میگنیفیکیشن سے ضرب دیا جاتا ہے۔ مڈل اسکولوں میں استعمال ہونے والی خوردبین کے آئی پیس اور معروضی لینز کو تبدیل کیا جا سکتا ہے، اور آئی پیسز عام طور پر 5x اور 10x ہوتے ہیں۔ ایک چھوٹی خوردبین کی آئی پیس عام طور پر صرف 10x ہوتی ہے، اور میں نے Escherichia coli (E.coli)، Staphylococcus aureus، Bacillus subtilis، اور Bacillus megaterium (بیضوں کو دیکھنے کے لیے استعمال کیا جاتا ہے) دیکھا ہے۔
