بیکٹیریا کے مشاہدے کے لیے کس قسم کی خوردبین کا استعمال کیا جانا چاہیے؟
آپٹیکل خوردبین اشیاء کو میگنفائنگ اور ان کا مشاہدہ کرنے کا ایک درست آلہ ہے۔ مختلف نظری خوردبین مختلف قسم کے نمونوں کا مشاہدہ کر سکتی ہیں۔ مائیکرو بایولوجی ریسرچ، پلانٹ ریسرچ اور جانوروں کی تحقیق جیسی صنعتوں کے صارفین کو بیکٹیریا کے سائز کا درجہ دیکھنے کی ضرورت ہے۔ تو ایسے نمونوں کا مشاہدہ کرتے وقت کس قسم کی خوردبین استعمال کرنی چاہیے؟ یہ مقالہ تفصیل سے تجزیہ کرتا ہے۔
اس سوال کا جواب بیکٹیریا کی جسامت، انسانی آنکھوں کی ریزولوشن اور خوردبین کے پہلوؤں سے لیا جا سکتا ہے۔
1. بیکٹیریا کے سیل کا سائز عام طور پر مائکرون پیمانے پر ہوتا ہے۔ E.coli کو مثال کے طور پر لیں: لمبائی تقریباً 1um ہے اور چوڑائی تقریباً 0.5um ہے۔
2. ریزولوشن سے مراد دو اشیاء کے درمیان کم از کم فاصلہ ہے جسے واضح طور پر پہچانا جا سکتا ہے۔
خوردبین کی ریزولیوشن سے مراد دو اشیاء کے درمیان کم از کم فاصلہ ہے جسے خوردبین کے وسعت اور تصاویر کے بعد واضح طور پر پہچانا جا سکتا ہے۔
آلے کی ریزولیوشن سے مراد ماپا آبجیکٹ کی مائیکرو سٹرکچر کی معلومات فراہم کرنے کے لیے آلے کی صلاحیت ہے۔ ریزولوشن جتنی زیادہ ہوگی، اتنی ہی تفصیلی معلومات فراہم کی جائیں گی۔ ایمپلیفیکیشن کی حد سے آگے بڑھنے کو غلط ایمپلیفیکیشن کہا جاتا ہے، جو باریک ساخت کے بارے میں مزید معلومات فراہم نہیں کر سکتا۔
3. انسانی آنکھ کی ریزولیوشن 0.1 ملی میٹر ہے، یعنی کافی روشنی اور 1 فٹ کے فاصلے کی حالت میں، دو پوائنٹس کے درمیان چھوٹا فاصلہ جسے انسانی آنکھ فرق کر سکتی ہے وہ ہے {{4} }.1 ملی میٹر
4. خلاصہ: بیکٹیریا کے وجود کو دیکھنے کے لیے، میگنیفیکیشن کم از کم: 0.1mm ÷ 0.5um=1000 ÷ 5 =200 بار ہونا چاہیے۔ تاہم، اس میگنیفیکیشن میں، بیکٹریا (Escherichia coli) دیکھا گیا صرف ایک چھوٹا سا نقطہ ہے۔ اس کی مزید لطیف ساختی معلومات کو دیکھنے کے لیے، خوردبین کی میگنیفیکیشن کو بہتر کرنا ہوگا۔
5. عام آپٹیکل مائکروسکوپ کی ریزولیوشن نظر آنے والی روشنی کی طول موج (390~770nm) سے محدود ہوتی ہے، جو کہ عام طور پر 1000 گنا سے زیادہ نہیں ہوتی، جو کہ عام آپٹیکل مائکروسکوپ کی ایمپلیفیکیشن انتہائی قدر ہے۔ 1000 بار سے زیادہ کی میگنیفیکیشن زیادہ لطیف ساختی معلومات فراہم نہیں کر سکتی، جس کا تعلق غلط امپلیفیکیشن کے دائرہ کار سے ہے۔
6. الیکٹران مائکروسکوپ کی میگنیفیکیشن 800،000 بار تک پہنچ سکتی ہے، اور اس کا بنیادی اصول عام آپٹیکل مائکروسکوپ جیسا ہی ہے، جو ہائی وولٹیج کے ذریعے مختصر طول موج والی الیکٹران لہریں پیدا کرتا ہے۔
جب آپ 400 بار (10x، 40x) زوم کرتے ہیں تو آپ بیکٹیریا کو بمشکل دیکھ سکتے ہیں، لیکن یہ صرف سوئی کی نوک کا سائز ہے، بالکل نقطوں کی طرح۔ عام طور پر، ہم اب بھی مشاہدے کے لیے 1000 بار (10x، 100x) میں زوم ان کرتے ہیں۔ اس وقت، بیکٹیریا کی ظاہری شکل اب بھی واضح طور پر دیکھی جا سکتی ہے، یہاں تک کہ خاص طور پر رنگے ہوئے فلاجیلا کے بعد بھی۔ 1000 بار زوم کریں اور آپ کو آئل آئینے کی ضرورت ہوگی۔ نام نہاد تیل کا آئینہ مقصد لینس اور کور گلاس کے درمیان خوشبودار ٹار کا ایک قطرہ گرانا ہے۔ خوشبودار ٹار کا ہلکا اضطراری انڈیکس ہوا کے مقابلے میں زیادہ ہوتا ہے، تاکہ ایک بڑا اضافہ استعمال کیا جا سکے۔
10x اور 40x اشارہ کرتے ہیں کہ یہ لینس 10x اور 40x سے بڑھا ہوا ہے۔ اس خوردبین کی کل میگنیفیکیشن حاصل کرنے کے لیے آئی پیس کی میگنیفیکیشن کو مقصدی لینس کی میگنیفیکیشن سے ضرب دیا جاتا ہے۔ مڈل اسکول میں استعمال ہونے والے خوردبین کے آئی پیس اور معروضی لینس کو تبدیل کیا جا سکتا ہے، اور آئی پیس عام طور پر 5x اور 10x ہوتی ہے۔ ایک بہتر خوردبین کی آئی پیس عام طور پر صرف 10x ہوتی ہے، اور میں نے Escherichia E.coli، Staphylococcus aureus، Bacillus subtilis، اور Bacillus megaterium (بیضوں کو دیکھنے کے لیے استعمال کیا جاتا ہے) دیکھا ہے۔
