آئل لینس کی میگنیفیکیشن عام معروضی لینس سے زیادہ کیوں ہوتی ہے؟
مائکروبیولوجیکل تجربات میں داغ لگانے سے پہلے بیکٹیریا کو ٹھیک کرنے کی ضرورت کی وجوہات:
1: خلیات کو مار ڈالو اور رنگنے میں آسانی پیدا کریں۔
دو: بیکٹیریا کو شیشے کی سلائیڈ پر لگائیں اور پانی سے آسانی سے نہ دھوئے۔
ٹھیک کرتے وقت، آہستہ آہستہ خشک کریں. اگر آپ واقعی اس عمل کو تیز کرنا چاہتے ہیں، تو آپ اسے الکحل کے لیمپ کے شعلے سے کچھ فاصلے پر چند بار خشک کر سکتے ہیں۔ شیشے کو خشک نہ کریں تاکہ یہ گرم ہو جائے، ورنہ یہ بیکٹیریا کی زندگی کو ختم کر سکتا ہے۔
گرام داغ اور بیکٹیریا کا خوردبین مشاہدہ
تجرباتی اصول
گرام سٹیننگ کا اصول: گرام سٹیننگ پر بیکٹیریا کے مختلف رد عمل ان کی سیل کی دیواروں کی مختلف ساخت اور ساخت کی وجہ سے ہوتے ہیں۔ گرام پازیٹو بیکٹیریا کی سیل وال بنیادی طور پر پیپٹائڈوگلیکانز کا نیٹ ورک ہے۔ جب ایتھنول کے ساتھ علاج کیا جاتا ہے، تو پانی کی کمی کی وجہ سے نیٹ ورک کی ساخت کا تاکنا سائز چھوٹا ہو جاتا ہے، اور پارگمیتا کم ہو جاتی ہے، جس سے کرسٹل وایلیٹ-آئیوڈین کا کمپلیکس بنتا ہے۔ مادہ آسانی سے خارج نہیں ہوتا اور خلیوں میں رہتا ہے۔ رنگ برنگی اور کاؤنٹر سٹیننگ کے بعد، بنیادی ڈائی کا نیلا جامنی رنگ اب بھی برقرار ہے۔ گرام منفی بیکٹیریا کی سیل وال پیپٹائڈوگلیان پرت پتلی ہے اور اس میں لپڈ مواد زیادہ ہے۔ لہٰذا، رنگین ہونے کے دوران، لپڈز ایتھنول (یا ایسیٹون) کے ذریعے تحلیل ہو جاتے ہیں، اور خلیے کی دیوار کی پارگمیتا بڑھ جاتی ہے، جس سے کرسٹل وایلیٹ-آئیوڈین کمپلیکس بن جاتا ہے، اس کا اخراج نسبتاً آسان ہے۔ کاؤنٹر سٹین کے ساتھ کاؤنٹر سٹیننگ کے بعد، خلیات کاؤنٹر سٹین کے سرخ رنگ سے داغدار ہو جاتے ہیں۔ مائیکروسکوپ امیجنگ کا اصول: جدید عام آپٹیکل خوردبین تصویروں کو بڑا کرنے کے لیے دو لینس سسٹم، آئی پیس اور معروضی لینز استعمال کرتی ہیں، اس لیے انھیں اکثر کمپاؤنڈ خوردبین کہا جاتا ہے۔ خوردبین کے نظری نظام میں، معروضی لینس کی کارکردگی سب سے اہم ہے۔ آئل لینس میں سب سے بڑا اضافہ ہوتا ہے اور یہ مائکرو بائیولوجیکل ریسرچ کے لیے سب سے اہم ہے۔ سلائیڈ اور لینس کے درمیان لینس آئل کے قطرے شامل کرنے کا بنیادی مقصد روشنی کی چمک کو بڑھانا اور مائکروسکوپ کی ریزولوشن کو بڑھانا ہے۔ ہوا کے بجائے تیل کا استعمال روشنی کے پھیلاؤ کے ذریعہ کے طور پر روشنی کے اضطراب یا مکمل انعکاس کو کم کرتا ہے، جس سے مشاہدہ شدہ تصویر واضح ہوجاتی ہے۔
بیکٹیریل کالونیوں کو کم میگنیفیکیشن مائکروسکوپ کے نیچے دیکھیں (سلائیڈ کو حرکت دیتے رہیں، اگر آپ کو سرخ سایہ محسوس ہوتا ہے، تو فوراً رک جائیں، میگنیفیکیشن کو ایڈجسٹ کریں، اگر یہ کالونی نہیں ہے، دیکھنا جاری رکھیں)، لینس بیرل کو اوپر کریں۔ ، اور پھر آئل لینس پر سوئچ کریں۔ نمونے والے حصے میں دیودار کے تیل کا ایک قطرہ شامل کریں، اور لینس کے بیرل کو احتیاط سے نیچے کرنے کے لیے موٹے ایڈجسٹر کا استعمال کریں تاکہ تیل کا لینس عینک کے تیل میں ڈوب جائے اور تقریباً نمونے کے ساتھ رابطے میں رہے۔ کنڈینسر کو بلند ترین مقام پر اٹھائیں اور یپرچر کھولیں۔ عینک کے بیرل کو آہستہ آہستہ اوپر کرنے کے لیے موٹے ایڈجسٹر کا استعمال کریں جب تک کہ منظر کے میدان میں آبجیکٹ کی تصویر ظاہر نہ ہو اور اسے واضح اور فوکس کرنے کے لیے فائن ایڈجسٹر کا استعمال کریں۔
