آپٹیکل اور الیکٹران مائکروسکوپی کے نمونوں کی تیاری کے طریقے

آپٹیکل اور الیکٹران مائکروسکوپی کے نمونوں کی تیاری کے طریقے

مائکروسکوپک تیاری کے طریقوں میں عام طور پر چار قسمیں شامل ہوتی ہیں: سیکشننگ کا طریقہ، مکمل ماؤنٹ طریقہ، سمیر کا طریقہ اور ٹیبلٹنگ کا طریقہ۔

① سلائسنگ کا طریقہ۔ آپٹیکل مائکروسکوپ کے ٹکڑے کی موٹائی 2 اور 25 مائکرون کے درمیان ہے۔ عام طور پر، جانوروں اور پودوں کے مواد کے لیے تقریباً 10 مائیکرون کی موٹائی مناسب ہے۔ ایمبیڈنگ میڈیم کے لحاظ سے سیکشننگ کے طریقے مختلف ہوتے ہیں۔ عام طور پر پیرافین سیکشننگ کا طریقہ، کاٹن کولائیڈ سیکشننگ کا طریقہ، منجمد سیکشننگ کا طریقہ، اور ایتھیلین گلائکول میتھکریلیٹ طریقہ (جسے GMA طریقہ کہا جاتا ہے) استعمال کیا جاتا ہے۔ پیرافین سیکشننگ کے طریقہ کار میں فکسیشن، ایمبیڈنگ، سیکشننگ، سٹیننگ، ڈی ہائیڈریشن اور ماؤنٹنگ جیسے اقدامات شامل ہیں۔ کلید یہ ہے کہ پیرافین میں حیاتیاتی مواد کو سرایت کریں، پیرافین کو ایک سہارے کے طور پر استعمال کریں، اور موم کے بلاک میں ڈوبے ہوئے حیاتیاتی مواد کو مثالی پتلی ٹکڑوں میں کاٹ دیں۔ آپریشن کا عمل یہ ہے: فکسیشن → واٹر واشنگ → الکحل ڈی ہائیڈریشن مرحلہ وار کم ارتکاز سے اعلی ارتکاز تک → زائلین شفافیت → ویکس ڈپنگ → ایمبیڈنگ → سیکشننگ → پیچ → زائلین ڈی ویکسنگ → مرحلہ وار الکحل کا علاج اعلی ارتکاز سے کم ارتکاز تک۔ آخر میں، یہ پانی → رنگنے → مرحلہ وار پانی کی کمی سے کم ارتکاز والی الکحل → زائلین شفافیت → رال گلو سیلنگ میں تبدیل ہوتا ہے۔ بنیادی اقدامات تمام پیداواری تکنیکوں میں یکساں ہیں۔

②انٹیگرل سگ ماہی کا طریقہ۔ واحد خلیات، چھوٹے جانداروں، یا منتشر اعضاء کے لیے مکمل ماؤنٹ تیاری کا طریقہ۔ اس طریقہ کار میں فکسیشن، سٹیننگ، ڈی ہائیڈریشن، شفافیت اور بڑھنے کے مختلف مراحل بھی درکار ہیں۔ یہ طریقہ پیرامیشیا اور کیڑوں کے منہ کے حصوں کو تیار کرنے کے لیے استعمال کیا جاتا ہے۔

③سمیر کا طریقہ۔ تیاری کا ایک طریقہ جس میں آسانی سے منتشر حیاتیاتی نمونے شیشے کی سلائیڈ پر پھیلائے جاتے ہیں۔ خون کا سمیر ایک مثال ہے۔

④ ٹیبلٹ دبانے کا طریقہ۔ قدرتی اور آسانی سے منتشر ٹشوز یا بافتوں کو جو پروسیسنگ کے بعد آسانی سے منتشر ہو جاتے ہیں، جیسے کہ جانوروں کے اسپرماٹوسائٹس اور جڑ کے نوک والے خلیے، شیشے کی سلائیڈ پر رکھیں، ایک کور سلپ شامل کریں، اور ٹشو کو طاقت سے کچل دیں تاکہ خلیات یا خلیات کے اندر کی ساخت بن جائے۔ پیداوار کے طریقہ کار کی ایک پرت میں پھیلائیں۔ دبانے کا طریقہ اکثر کروموسوم کا مشاہدہ کرنے کے لیے استعمال کیا جاتا ہے، جو عام طور پر میجینٹا ایسیٹیٹ، لائچین ریڈ اور کاربولک فوچن سے داغے ہوتے ہیں۔