ملٹی فوٹون لیزر اسکیننگ مائیکروسکوپی کے فوائد اور حدود
1. سرخ یا اورکت روشنی سے پرجوش، روشنی کا بکھرنا چھوٹا ہوتا ہے (چھوٹے ذرات کا بکھرنا طول موج کی چوتھی طاقت کے الٹا متناسب ہوتا ہے)۔
2. پن ہولز کی ضرورت نہیں، امیجنگ کراس سیکشن سے زیادہ بکھرے ہوئے فوٹان جمع کرنے کے قابل۔
3. پن ہولز ڈی فوکسڈ یا فوکل ایریاز سے خارج ہونے والے بکھرے ہوئے فوٹونز کی تمیز نہیں کر سکتے ہیں، اور ملٹی فوٹونز گہری امیجنگ میں سگنل ٹو شور کا تناسب بہتر رکھتے ہیں۔
4. سنگل فوٹوون کے اتیجیت کے لیے استعمال ہونے والی الٹرا وائلٹ یا نظر آنے والی روشنی سیم کے فوکل جہاز تک پہنچنے سے پہلے نمونے کے ذریعے آسانی سے جذب اور کم ہو جاتی ہے، جس سے گہری تہوں کو اکسانا مشکل ہو جاتا ہے۔
5. حیاتیاتی مائیکروسکوپی مشاہدے کے لحاظ سے، پہلی بات یہ ہے کہ جسم کی فعال حالت کو نقصان نہ پہنچے، اور پانی، آئن کے ارتکاز، آکسیجن اور غذائی اجزاء کی گردش کو برقرار رکھا جائے۔ روشنی کے مشاہدے کے میدان میں، تھرمل اور فوٹوون دونوں توانائی کو شعاع ریزی کی مقدار اور ہلکی توانائی کے اندر رہنا چاہیے جو خلیوں کو نقصان نہیں پہنچاتی ہے۔
6. ملٹی فوٹون مائکروسکوپی کے بھی بہت سے فوائد ہیں۔ سہ جہتی ریزولیوشن، گہرائی پر حملہ، بکھرنے کی کارکردگی، پس منظر کی روشنی، سگنل ٹو شور کا تناسب، کنٹرول وغیرہ کے لحاظ سے، لیزر خوردبین میں ایسی بے مثال یا اعلیٰ خصوصیات ہیں جو پچھلی لیزر خوردبین کے پاس نہیں تھیں۔
ملٹی فوٹون کنفوکل لیزر اسکیننگ مائیکروسکوپ کو مختلف تحقیق اور اطلاق کے شعبوں تک بڑھایا گیا ہے یہ نمونوں پر ان کی فطری حالت میں سہ جہتی غیر تباہ کن مشاہدہ کر سکتا ہے اور نظام کی ریزولوشن اور سگنل ٹو شور کے تناسب کو بہتر بنا سکتا ہے اور ملٹی فوٹن ایکسائٹیشن کے بعد مادی خصوصیات میں ہونے والی تبدیلیوں کو بروئے کار لاتے ہوئے، تین جہتی اونچائی والے ڈیٹا سٹوریج اور تھری ڈائمینشنل ڈائریکشن کو بھی حاصل کر سکتا ہے۔ اعلی اطلاق کی قدر یہ یقین کیا جا سکتا ہے کہ ملٹی فوٹون کنفوکل مائیکروسکوپی سے متعلق مکینیکل، مادی اور لیزر ٹیکنالوجیز کی مزید ترقی کے ساتھ، ملٹی فوٹون کنفوکل لیزر سکیننگ مائیکروسکوپی میں زیادہ ترقی اور وسیع تر ایپلی کیشنز ہوں گی۔
اس کے نقصانات درج ذیل ہیں۔
1. صرف فلوروسینس امیجنگ کے لیے۔
2. اگر نمونے میں کروموفورس شامل ہیں جو جوش کی روشنی کو جذب کر سکتے ہیں، جیسے روغن، تو نمونہ تھرمل نقصان کا شکار ہو سکتا ہے۔
3. ریزولیوشن قدرے کم ہو گئی ہے، اگرچہ کنفوکل چھوٹے سوراخوں کو بیک وقت استعمال کر کے اسے بہتر بنایا جا سکتا ہے، لیکن سگنل کا نقصان ہو گا۔
4. مہنگے الٹرا فاسٹ لیزرز کی حدود کی وجہ سے، ملٹی فوٹون سکیننگ خوردبین کی قیمت نسبتاً زیادہ ہے۔
