فلوروسینس مائکروسکوپ کے اصولوں کا اطلاق اور استعمال
فلوروسینس مائیکروسکوپس کے اصول اور ساختی خصوصیات: فلوروسینس مائکروسکوپ ایک خاص طول موج (جیسے الٹرا وائلٹ لائٹ 3650 انچ یا ارغوانی نیلی روشنی 4200 انچ) کی روشنی کے اخراج کے لیے اعلیٰ برائٹ کارکردگی کے ساتھ ایک نقطہ روشنی کا ذریعہ استعمال کرتی ہے۔ نمونہ میں مائدیپتی پرجوش. مادہ مختلف رنگوں کی فلوروسینس خارج کرنے کے بعد، اس کے بعد معروضی لینس اور آئی پیس کی میگنیفیکیشن کے ذریعے مشاہدہ کیا جاتا ہے۔ اس طرح، ایک مضبوط متضاد پس منظر کے تحت، یہاں تک کہ اگر فلوروسینس بہت کمزور ہے، اس کی شناخت کرنا آسان ہے اور اس میں اعلی حساسیت ہے۔ یہ بنیادی طور پر سیل کی ساخت اور فنکشن کے ساتھ ساتھ کیمیائی ساخت کے مطالعہ کے لیے استعمال ہوتا ہے۔ فلوروسینس مائکروسکوپ کا بنیادی ڈھانچہ ایک عام آپٹیکل مائکروسکوپ کے علاوہ کچھ لوازمات (جیسے فلوروسینس لائٹ سورس، ایکسائٹیشن فلٹر، دو رنگوں کا بیم اسپلٹر، بلاکنگ فلٹر وغیرہ) پر مشتمل ہوتا ہے۔ فلوروسینٹ لائٹ ماخذ - عام طور پر ایک انتہائی ہائی پریشر مرکری لیمپ (50 سے 200W) کا استعمال کرتا ہے، جو مختلف طول موج کی روشنی خارج کر سکتا ہے، لیکن ہر فلوروسینٹ مادے کی ایک اتیجیت طول موج ہوتی ہے جو مضبوط ترین فلوروسینس پیدا کرتی ہے، اس لیے ایک اتیجیت فلٹر (عام طور پر موجود ہوتے ہیں۔ بالائے بنفشی، جامنی، نیلے اور سبز اتیجیت فلٹرز)، جو صرف ایک مخصوص طول موج کی اتیجیت روشنی کو گزرنے اور نمونے کو روشن کرنے کی اجازت دیتے ہیں، جبکہ باقی تمام روشنی کو جذب کرتے ہیں۔ ہر ایک مادہ کو جوش کی روشنی سے شعاع کرنے کے بعد، یہ بہت کم وقت میں شعاع ریزی کی طول موج سے زیادہ لمبی طول موج کے ساتھ مرئی فلوروسینس خارج کرتا ہے۔ فلوروسینس مخصوص ہے اور عام طور پر جوش کی روشنی سے کمزور ہے۔ مخصوص فلوروسینس کا مشاہدہ کرنے کے لیے، معروضی لینس کے پیچھے ایک بلاکنگ (یا دبانے والا) فلٹر درکار ہوتا ہے۔ اس کے دو کام ہیں: ایک یہ ہے کہ جوش کی روشنی کو جذب کرنا اور اسے آئی پیس میں داخل ہونے سے روکنا ہے تاکہ فلوروسینس میں خلل ڈالنے اور آنکھوں کو نقصان نہ پہنچے۔ دوسرا یہ ہے کہ مخصوص فلوروسینس کو منتخب کریں اور اسے مخصوص فلوروسینس رنگ دکھانے کے لیے گزرنے دیں۔ دونوں فلٹرز کو منتخب اور ایک ساتھ استعمال کرنا چاہیے۔
