مائکروجنزموں کی تعداد کا تعین - خوردبین براہ راست گنتی کا طریقہ!
بنیادی
خوردبینی براہ راست گنتی کا طریقہ ایک سادہ، تیز اور بدیہی طریقہ ہے کہ نمونے کے معطلی کی تھوڑی سی مقدار کو ایک خاص شیشے کی سلائیڈ (جسے بیکٹیریا کاؤنٹر بھی کہا جاتا ہے) پر ایک مخصوص رقبہ اور حجم کے ساتھ جانچا جائے، اور براہ راست اس کے نیچے شمار کیا جائے۔ ایک خوردبین. فی الحال، اندرون اور بیرون ملک عام طور پر استعمال ہونے والے بیکٹیریا کاؤنٹر میں شامل ہیں: خون کے خلیات کی گنتی کا بورڈ، پیٹروف-ہاؤزر بیکٹیریا کاؤنٹر اور ہاکسلے بیکٹیریا کاؤنٹر، وغیرہ۔ ان سب کو خمیر، بیکٹیریا، اور مولڈ بیضوں کی گنتی کے لیے استعمال کیا جا سکتا ہے، اور بنیادی اصول ایک جیسے ہیں. مؤخر الذکر دو بیکٹیریا کاؤنٹرز کا کل حجم 0 ہے۔{4}} کور شیشے سے ڈھانپنے کے بعد 2mm3 ہے، اور کور گلاس اور سلائیڈ کے درمیان فاصلہ صرف 0.02mm ہے، لہذا چھوٹے خلیات جیسے بیکٹیریا کا مشاہدہ اور شمار کیا جا سکتا ہے تیل کے وسرجن معروضی لینس سے۔ ان بیکٹیریا کاؤنٹرز کو استعمال کرنے کے علاوہ، مائیکروسکوپ کے نیچے سمیر ایریا کے بصری فیلڈ ایریا کے تناسب کو براہ راست دیکھنے کا تخمینہ لگانے کا طریقہ بھی موجود ہے۔ یہ طریقہ عام طور پر دودھ کے جراثیمی معائنہ کے لیے استعمال ہوتا ہے۔ خوردبین کے براہ راست گنتی کے طریقہ کار کا فائدہ یہ ہے کہ یہ بدیہی، تیز اور کام کرنے میں آسان ہے۔ لیکن اس طریقہ کار کا نقصان یہ ہے کہ ناپے گئے نتائج عام طور پر مردہ اور زندہ بیکٹیریا کا مجموعہ ہوتے ہیں۔ فی الحال، اس کمی کو دور کرنے کے لیے کچھ طریقے موجود ہیں، جیسے زندہ بیکٹیریا کو داغدار مائیکرو چیمبر کلچر (مختصر وقت) کو ملانا اور صرف زندہ بیکٹیریا کی گنتی کے مقصد کو حاصل کرنے کے لیے سیل ڈویژن انحیبیٹرز کو شامل کرنا۔
اس تجربے میں، ایک ہیمو سائیٹومیٹر کو بطور مثال خوردبین کے نیچے براہ راست گنتی کرنے کے لیے استعمال کیا گیا۔ دیگر دو بیکٹیریا کاؤنٹرز کے استعمال کے طریقوں کے لیے، براہ کرم ہر مینوفیکچرر کی ہدایات دیکھیں۔ ہیمو سائیٹومیٹر کے ساتھ مائکروسکوپ کے نیچے براہ راست گنتی ایک عام طور پر استعمال ہونے والا مائکروبیل گنتی کا طریقہ ہے۔ گنتی کا بورڈ شیشے کی ایک خاص سلائیڈ ہے، جس پر چار سلاٹ تین پلیٹ فارم بناتے ہیں۔ وسط میں وسیع پلیٹ فارم کو ایک مختصر افقی سلاٹ کے ذریعے دو حصوں میں تقسیم کیا گیا ہے، اور پلیٹ فارم کے ہر طرف ایک گرڈ کے ساتھ قطار ہے۔ ہر گرڈ کو نو بڑے چوکوں میں تقسیم کیا گیا ہے، اور درمیانی بڑا مربع گنتی کا کمرہ ہے۔ گنتی کے کمرے کے پیمانے میں عام طور پر دو خصوصیات ہیں، ایک یہ کہ ایک بڑے مربع کو 25 درمیانی مربعوں میں تقسیم کیا گیا ہے، اور ہر درمیانی مربع کو 16 چھوٹے مربعوں میں تقسیم کیا گیا ہے۔ دوسرا یہ کہ ایک بڑے مربع کو 16 درمیانی مربعوں میں تقسیم کیا گیا ہے، اور ہر درمیانی مربع کو 25 چھوٹے مربعوں میں تقسیم کیا گیا ہے، لیکن اس سے کوئی فرق نہیں پڑتا ہے کہ گنتی کا بورڈ کس قسم کا ہے، اس میں 400 چھوٹے مربع ہیں ہر ایک بڑے مربع. ہر بڑے مربع کی سائیڈ کی لمبائی 1 ملی میٹر ہے، اور پھر ہر بڑے مربع کا رقبہ 1 ملی میٹر ہے 2۔ کور گلاس کو ڈھانپنے کے بعد، کور گلاس اور سلائیڈ گلاس کے درمیان اونچائی 0.1 ملی میٹر ہے، لہذا اس کا حجم گنتی کا چیمبر 0.1 ملی میٹر (ایک ملی لیٹر کا دس ہزارواں حصہ) ہے۔
