فلوروسینس مائکروسکوپ کو ان کے آپٹیکل راستوں کی بنیاد پر دو اقسام میں درجہ بندی کیا گیا ہے:
1. ٹرانسمیشن فلوروسینس مائکروسکوپ: کنڈینسر عینک کے ذریعہ نمونہ مواد سے گزر کر فلوروسینس کو جوش و خروش کے لئے اتیجیت لائٹ ماخذ کا استعمال کیا جاتا ہے۔ عام طور پر استعمال ہونے والے تاریک فیلڈ حراستیوں کو بھی استعمال کیا جاسکتا ہے ، اور عام حراستیوں کو عکاس کو ایڈجسٹ کرنے کے لئے استعمال کیا جاسکتا ہے تاکہ نمونہ پر جوش و خروش کی روشنی کو ری ڈائریکٹ اور سیڈلوب کیا جاسکے۔ یہ نسبتا old پرانا - فیشن فلوروسینس مائکروسکوپ ہے۔ اس کا فائدہ کم بڑھنے پر مضبوط فلوروسینس ہے ، لیکن اس کا نقصان یہ ہے کہ بڑھتی ہوئی اضافہ کے ساتھ اس کا فلوروسینس کم ہوتا ہے۔ لہذا ، بڑے نمونے والے مواد کو دیکھنے کے لئے یہ بہتر ہے۔
2. گرتی ہوئی لائٹ فلوروسینس مائکروسکوپ جدید دور میں تیار کردہ فلوروسینس مائکروسکوپ کی ایک نئی قسم ہے۔ مذکورہ بالا کے برعکس ، اتیجیت کی روشنی معروضی لینس سے نمونہ کی سطح پر گرتی ہے ، اسی مقصد کے عینک کا استعمال کرتے ہوئے فلوروسینس کو جمع کرنے کے لئے الیومینیشن کنڈینسر اور معروضی لینس کا استعمال کرتے ہیں۔ آپٹیکل راہ میں دوہری رنگ بیم اسپلٹر کو شامل کرنے کی ضرورت ہے ، جو ہلکے یورینیم سے 45 ڈگری کے علاوہ ہے۔ زاویہ ، جوش و خروش کی روشنی معروضی لینس میں ظاہر ہوتی ہے اور نمونے پر مرکوز ہوتی ہے۔ نمونے کے ذریعہ پیدا ہونے والی فلوروسینس کے ساتھ ساتھ معروضی لینس اور کور گلاس کی سطح سے بھی جوش و خروش کی روشنی کی عکاسی ہوتی ہے ، معروضی لینس میں داخل ہوتی ہے اور ڈبل کلر بیم اسپلٹر پر واپس آجاتی ہے ، جس سے جوش و خروش کی روشنی اور فلوروسینس کو الگ کرتے ہوئے۔ اس کے بعد بقایا جوش و خروش کی روشنی کو مسدود کرنے والے فلٹر کے ذریعہ جذب کیا جاتا ہے۔ اگر جوش و خروش کے فلٹرز/ڈوئل کلر بیم جداکار/بلاک کرنے والے فلٹرز کے مختلف امتزاج استعمال کیے جاتے ہیں تو ، وہ مختلف فلورسنٹ رد عمل کی مصنوعات کی ضروریات کو پورا کرسکتے ہیں۔ اس فلوروسینس مائکروسکوپ کے فوائد یکساں فیلڈ الیومینیشن ، واضح امیجنگ ، اور بڑے پیمانے پر بڑھنے کے ساتھ مضبوط فلوروسینس ہیں۔
(2) فلوروسینس مائکروسکوپ کے استعمال کے لئے ہدایات
1. روشنی کے منبع کو چالو کریں۔ الٹرا - ہائی پریشر مرکری لیمپ کو اپنی زیادہ سے زیادہ چمک تک پہنچنے کے ل few چند منٹ کے لئے پہلے سے گرم کرنے کی ضرورت ہے۔
2. ٹرانسمیشن فلوروسینس مائکروسکوپی کے لئے لیمپ کے منبع اور کنڈینسر کے مابین مطلوبہ جوش و خروش کے فلٹر کی تنصیب کی ضرورت ہوتی ہے ، اور معروضی عینک کے پیچھے اس سے متعلقہ بلاکنگ فلٹر۔ گرتی ہوئی لائٹ فلوروسینس مائکروسکوپ کو آپٹیکل راہ کے سلاٹ میں مطلوبہ جوش و خروش فلٹر/ڈوئل کلر بیم اسپلٹر/بلاک فلٹر بلاک داخل کرنے کی ضرورت ہے۔
3. ایک کم - پاور مائکروسکوپ کے ساتھ مشاہدہ کریں اور مختلف قسم کے فلوروسینس مائکروسکوپز کے ایڈجسٹمنٹ ڈیوائس کے مطابق روشنی کے منبع کے مرکز کو ایڈجسٹ کریں ، تاکہ یہ پورے الیومینیشن اسپاٹ کے مرکز میں واقع ہو۔
4. نمونہ رکھیں اور مشاہدے کے لئے اس پر توجہ دیں۔ استعمال کے دوران توجہ دی جانی چاہئے: آنکھوں کے نقصان سے بچنے کے لئے فلٹر انسٹال کرنے سے پہلے اپنی آنکھوں سے براہ راست مشاہدہ نہ کریں۔ جب تیل کے خوردبین کے ساتھ نمونوں کا مشاہدہ کرتے ہو تو ، ایک خصوصی غیر فلورسنٹ آئل مائکروسکوپ کا استعمال کرنا چاہئے۔ اعلی - پریشر مرکری لیمپ آف ہونے کے بعد ، اسے فوری طور پر آن نہیں کیا جاسکتا۔ اسے دوبارہ شروع کرنے میں 5 منٹ لگتے ہیں ، بصورت دیگر یہ غیر مستحکم ہوگا اور پارا لیمپ کی عمر کو متاثر کرے گا۔
()) نیلے رنگ کے وایلیٹ لائٹ فلٹر کا استعمال کرتے ہوئے تدریسی پلیٹ فارم پر فلوروسینس مائکروسکوپ کے تحت مشاہدہ کرتے ہوئے ، 0.01 ٪ ایکرائڈائن اورنج فلوروسینٹ ڈائی کے ساتھ داغے ہوئے خلیوں کو دیکھا جاسکتا ہے۔ نیوکلئس اور سائٹوپلازم فلوروسینس کے دو مختلف رنگ (گہرا سبز اور نارنجی سرخ) تیار کرنے کے لئے پرجوش ہیں۔
