الیکٹران مائکروسکوپ اور ڈیجیٹل مائکروسکوپ کے درمیان فرق
"ڈیجیٹل مائیکروسکوپ" دراصل آپٹیکل مائیکروسکوپ میں شامل ایک ڈیجیٹل امیجنگ ڈیوائس ہے، جو مائیکروسکوپ کے ذریعے بنائی گئی تصویر کو کمپیوٹر کی سکرین پر براہ راست دکھا سکتی ہے۔ یہ آپٹیکل خوردبین پر مبنی ہے، اور الیکٹران خوردبین کی امیجنگ اصول بنیادی فرق ہے۔ یہاں، ہمیں ریزولوشن اور میگنیفیکیشن کے درمیان فرق کرنے کی ضرورت ہے۔ جب ایک باریک چیز کو زوم کیا جاتا ہے اور اس کی تصویر بنائی جاتی ہے، تو اس کی اعلیٰ ریزولیوشن منعکس روشنی کی لہر کی طول موج پر منحصر ہوتی ہے۔ طول موج جتنی کم ہوگی، ریزولیوشن اتنی ہی زیادہ ہوگی۔ الیکٹران خوردبینیں عام نظر آنے والی روشنی سے بہت کم طول موج کے ساتھ ایکس رے امیجنگ کا استعمال کرتی ہیں، یقیناً اس کی ریزولوشن بہت زیادہ ہوتی ہے، جب کہ عام "ڈیجیٹل مائکروسکوپ" کی میگنیفیکیشن بڑی ہو سکتی ہے، لیکن ریزولوشن کو بہتر نہیں کیا جا سکتا۔
آپٹیکل مائکروسکوپ کی ریزولوشن روشنی کی لہر کی طول موج سے متعلق ہے۔ روشنی کی طول موج کے قریب اور اس سے چھوٹی اشیاء کے لیے، آپٹیکل خوردبین بے اختیار ہے۔ الیکٹران کی حرکت کی طول موج روشنی کی لہر کی طول موج سے بہت کم ہوتی ہے، اس لیے چھوٹی چیزوں کو دیکھا جا سکتا ہے۔ آپٹیکل مائیکروسکوپ ایک میگنیفائیڈ امیجنگ سسٹم ہے جو آپٹیکل لینسز کے سیٹ پر مشتمل ہوتا ہے، جب کہ الیکٹران مائکروسکوپ میں نظر آنے والی روشنی کی بجائے الیکٹران کا بہاؤ، لینز کی بجائے مقناطیسی میدان اور فوٹون کے بجائے الیکٹران کی حرکت ہوتی ہے، تاکہ ان چیزوں سے چھوٹی چیزیں جو آپٹیکل لینسز پر مشتمل ہوتی ہیں نظری نظام کی طرف سے دیکھا جا سکتا ہے.
الیکٹران مائکروسکوپ ایک بڑے پیمانے کا آلہ ہے جو نمونے پر الیکٹران کے بہاؤ کی منتقلی یا عکاسی اور برقی مقناطیسی لینس کی کثیر مرحلہ میگنیفیکیشن کے ذریعے فلوروسینٹ اسکرین پر تصاویر بنانے کے لیے الیکٹران بیم کو روشنی کے ذریعہ کے طور پر استعمال کرتا ہے۔ خوردبین نظر آنے والی روشنی کا استعمال کرتی ہے تاکہ چھوٹی اشیاء کے نظری آلات کی ایک بڑی تصویر بنائی جا سکے۔ خلاصہ طور پر، الیکٹران خوردبین مندرجہ ذیل پہلوؤں میں نظری خوردبین سے مختلف ہیں:
1. روشنی کے مختلف ذرائع۔ الیکٹران خوردبین کے ذریعہ استعمال ہونے والا روشنی کا ذریعہ الیکٹران گن کے ذریعہ خارج ہونے والا الیکٹران کا بہاؤ ہے ، جبکہ روشنی خوردبین کا روشنی کا ذریعہ نظر آنے والی روشنی (سورج کی روشنی یا روشنی) ہے۔ چونکہ الیکٹران کے بہاؤ کی طول موج روشنی کی لہر کے مقابلے میں بہت کم ہوتی ہے، اس لیے الیکٹران خوردبین کی میگنیفیکیشن اور ریزولوشن روشنی خوردبین کی نسبت نمایاں طور پر زیادہ ہے۔
2. مختلف لینز۔ الیکٹران مائیکروسکوپ میں میگنفائنگ آبجیکٹیو لینس ایک برقی مقناطیسی لینس ہے (ایک اینولر برقی مقناطیسی کنڈلی جو مرکزی حصے میں مقناطیسی میدان پیدا کر سکتی ہے)، جبکہ روشنی خوردبین کا مقصدی لینس شیشے سے بنا ایک آپٹیکل لینس ہے۔ الیکٹران مائیکروسکوپ میں برقی مقناطیسی لینز کے تین گروپ ہوتے ہیں، جو روشنی خوردبین میں کنڈینسر لینس، آبجیکٹیو لینس اور آئی پیس کے افعال کے برابر ہوتے ہیں۔
3. امیجنگ اصول مختلف ہے. الیکٹران خوردبین میں، معائنہ کیے جانے والے نمونے پر کام کرنے والی الیکٹران بیم کو برقی مقناطیسی لینس کے ذریعے بڑھایا جاتا ہے اور فلوروسینٹ اسکرین پر امیجنگ تک پہنچتا ہے یا امیجنگ کے لیے فوٹو حساس فلم پر کام کرتا ہے۔ الیکٹرانوں کی کثافت میں فرق کا طریقہ کار یہ ہے کہ جب الیکٹران کی شہتیر جانچنے کے لیے نمونے پر عمل کرتا ہے، تو واقعہ الیکٹران مادے کے ایٹموں سے ٹکرا کر بکھر جاتے ہیں۔ چونکہ نمونے کے مختلف حصوں میں الیکٹران کے لیے مختلف بکھرنے کی ڈگریاں ہوتی ہیں، اس لیے نمونے کی الیکٹران امیج کو رنگوں میں پیش کیا جاتا ہے۔ . روشنی خوردبین میں نمونے کی آبجیکٹ امیج کو چمک میں فرق کے طور پر پیش کیا جاتا ہے، جو نمونے کی مختلف ساختوں کی طرف سے متوجہ روشنی کی مقدار میں فرق کی وجہ سے ہوتا ہے جس کا معائنہ کیا جانا ہے۔
4. استعمال شدہ نمونہ کی تیاری کے طریقے مختلف ہیں۔ الیکٹران خوردبین کے مشاہدے کے لیے استعمال ہونے والے ٹشو سیل نمونوں کی تیاری کا طریقہ کار پیچیدہ ہے، اور تکنیکی دشواری اور قیمت زیادہ ہے۔ مواد جمع کرنے، فکسیشن، ڈی ہائیڈریشن اور ایمبیڈنگ کے لنکس میں خصوصی ریجنٹس اور آپریشنز کی ضرورت ہوتی ہے۔ آخر میں، ایمبیڈڈ ٹشو بلاکس کو الٹرا مائیکروٹوم میں 50-100 nm کی موٹائی کے ساتھ انتہائی پتلی نمونہ کے ٹکڑوں میں کاٹ کر ڈالنے کی ضرورت ہے۔ ہلکی مائیکروسکوپی کے ذریعے مشاہدہ کیے گئے نمونوں کو عام طور پر شیشے کی سلائیڈوں پر رکھا جاتا ہے، جیسے عام ٹشو سیکشن کے نمونے، سیل سمیر کے نمونے، ٹشو کمپریشن کے نمونے، اور سیل ڈراپ کے نمونے۔
