سیدھے بائیو فلوروسینس مائکروسکوپ
فلوروسینس مائکروسکوپی کا اصول یہ ہے کہ ایک انتہائی موثر پوائنٹ لائٹ ماخذ (جیسے الٹرا ہائی پریشر مرکری لیمپ) کو روشنی کی ایک خاص طول موج (جیسے الٹرا وایلیٹ لائٹ 3650 λ یا ارغوانی بلیو لائٹ 4200 λ) کو ایک رنگ کے فلٹر سسٹم کے ذریعے اتیجیت کی روشنی کے طور پر استعمال کرنے کے لئے استعمال کرنا ہے ، جو اتیجیت کے مختلف رنگوں کے ذریعے فلورنس لائٹ کے طور پر ، جو فلوروسینٹ مادوں کو ایک خاص طور پر پائے جاتے ہیں۔ اس کے بعد ، یہ معروضی لینس کے پیچھے بلاک (یا دبانے) کے فلٹر کے ذریعہ فلٹر کیا جاتا ہے اور آئپیس کے میگنفائنگ اثر کے ذریعے مشاہدہ کیا جاتا ہے۔
مسدود کرنے والے فلٹر کے دو افعال ہوتے ہیں: او ly ل ، یہ فلوروسینس میں مداخلت سے بچنے اور آنکھوں کو نقصان پہنچانے سے بچنے کے لئے آئیپیس میں داخل ہونے سے جوش و خروش کو جذب کرتا ہے اور بلاک کرتا ہے۔ دوسرا یہ ہے کہ ایک مخصوص فلوروسینٹ رنگ کی نمائش کرتے ہوئے ، مخصوص فلوروسینس کو گزرنے کا انتخاب اور اس کی اجازت دی جائے۔
فلوروسینس مائکروسکوپ کو روشنی کے راستے کے اصول کی بنیاد پر دو اقسام میں تقسیم کیا جاسکتا ہے۔
1. ٹرانسمیشن فلوروسینس مائکروسکوپ
پرانے فلوروسینس مائکروسکوپز نمونے کے مواد کے ذریعہ جوش و خروش روشنی کے ماخذ کو منتقل کرکے فلوروسینس کو حوصلہ افزائی کرنے کے لئے اسپاٹ لائٹ کا استعمال کرتے ہیں۔ اس کا فائدہ کم بڑھنے پر مضبوط فلوروسینس ہے ، لیکن اس کا نقصان یہ ہے کہ بڑھتی ہوئی اضافہ کے ساتھ اس کا فلوروسینس کم ہوتا ہے۔ لہذا یہ صرف بڑے نمونے والے مواد کو دیکھنے کے لئے موزوں ہے۔
2. گرتی ہوئی لائٹ فلوروسینس مائکروسکوپ
جوش و خروش کی روشنی مقصد کے عینک سے نمونہ کی سطح پر گرتی ہے ، اسی مقصد لینس کا استعمال کرتے ہوئے جیسے الیومینیشن کنڈینسر اور فلوروسینس کو جمع کرنے کے لئے معروضی لینس۔
ایک دوہری رنگین بیم اسپلٹر (ڈیکروک آئینے) کو آپٹیکل راہ میں شامل کرنے کی ضرورت ہے ، جو آپٹیکل محور کے ساتھ 45 ڈگری کا زاویہ تشکیل دیتا ہے۔ جوش و خروش کی روشنی معروضی عینک میں جھلکتی ہے اور نمونے پر مرکوز ہے۔ نمونے کے ذریعہ پیدا ہونے والی فلوروسینس کے ساتھ ساتھ معروضی لینس اور کور گلاس کی سطح سے بھی جوش و خروش کی روشنی کی عکاسی ہوتی ہے ، ایک ہی وقت میں معروضی لینس میں داخل ہوتی ہے اور جوش و خروش کی روشنی اور فلوروسینس کو الگ کرنے کے لئے ڈوئل کلر بیم اسپلٹر پر واپس آجاتی ہے۔ اس کے بعد بقیہ جوش و خروش کی روشنی کو فلٹر جذب کے ذریعہ مسدود کردیا جاتا ہے۔ اگر جوش و خروش کے فلٹرز ، دوہری رنگین بیم جداکار ، اور بلاک کرنے والے فلٹرز کے مختلف امتزاج استعمال کیے جاتے ہیں تو ، وہ مختلف فلورسنٹ رد عمل کی مصنوعات کی ضروریات کو پورا کرسکتے ہیں۔
اس فلوروسینس مائکروسکوپ کے فوائد یکساں فیلڈ الیومینیشن ، واضح امیجنگ ، اور بڑے پیمانے پر بڑھنے کے ساتھ مضبوط فلوروسینس ہیں۔
