روشنی مائکروسکوپی کے لئے نمونے کی ضروریات کیا ہیں؟
آپٹیکل مائکروسکوپ کے نمونے کی تیاری کے عمل میں، نمونے کے ٹکڑے کی موٹائی 2 اور 25um کے درمیان ہوتی ہے۔ الیکٹران مائیکروسکوپ کے سلائس کی موٹائی 50-100nm کے اندر ہے (ہائی وولٹیج الیکٹران مائکروسکوپ کے علاوہ، نمونے کی موٹائی 1um تک پہنچ سکتی ہے)، اس لیے استعمال شدہ سلائسنگ کا طریقہ ایک جیسا نہیں ہے۔
کیریئر کے لحاظ سے، آپٹیکل مائکروسکوپ سیکشن کا کیریئر شیشے کی سلائیڈ ہے، اور الیکٹران مائکروسکوپ سیکشن کا کیریئر کیریئر گرڈ ہے۔
فکسیشن کے لحاظ سے، آپٹیکل مائکروسکوپ سیکشنز ایک کمپاؤنڈ فکسٹیو کے ساتھ فکس کیے جاتے ہیں، جبکہ الیکٹران مائکروسکوپ سیکشنز کو ایک ہی فکسٹیو کے ساتھ بار بار فکس کیا جاتا ہے۔
داغ لگانے کے معاملے میں، نظری نمونوں کا داغ لگانا نسبتاً آسان ہے۔ مختلف مشاہداتی نمونوں اور نظری خوردبین کی قسم کے مطابق، یہ عام طور پر کچھ مقررہ داغ استعمال کرنے کے لیے کافی ہوتا ہے۔ الیکٹران مائکروسکوپ کے نمونوں کو دوبارہ داغدار کرنے کے بہت سے طریقے ہیں، اور وہ بہت پیچیدہ بھی ہیں، جیسے منفی داغ، چاندی کے داغ وغیرہ۔
ایمبیڈنگ کے لحاظ سے، پیرافین، کولیڈین، جیلیٹن وغیرہ آپٹیکل مائکروسکوپ سیکشنز کے لیے سرایت کرنے والے ایجنٹوں کے طور پر استعمال ہوتے ہیں۔ epoxy رال، polystyrene رال، isobutylene resin اور water-soluble resin کو الیکٹران مائکروسکوپ سیکشنز کے لیے سرایت کرنے والے ایجنٹ کے طور پر استعمال کیا جاتا ہے۔
خوردبین کے منظر کے میدان کو یکساں اور کافی روشنی حاصل کرنے کے لیے، جب مائکروسکوپ کو پہلے انسٹال اور ڈیبگ کیا جاتا ہے تو الیومینیشن آپٹیکل پاتھ سسٹم کو ایڈجسٹ کرنا ضروری ہے۔ ضروریات اس کے علاوہ، الیومینیشن آپٹیکل پاتھ سسٹم کی ایڈجسٹمنٹ کو درست طریقے سے سمجھنا مائکروسکوپ کے استعمال کے عمل میں لائٹ بلب کو تبدیل کرنے کے بعد ایک ضروری قدم ہے، اور یہ وقتا فوقتا مائکروسکوپ کی کارکردگی کو جانچنے کا ایک ضروری ذریعہ ہے۔ روزانہ استعمال کے عمل. مائکروسکوپ الیومینیشن آپٹیکل پاتھ سسٹم کی ایڈجسٹمنٹ میں بنیادی طور پر مندرجہ ذیل 4 آئٹمز شامل ہیں: 1. مائکروسکوپ کے باہر لائٹنگ سورس لیمپ چیمبر کی ابتدائی ایڈجسٹمنٹ ① سب سے پہلے، لیمپ چیمبر کے شیل کو کھولیں، اور ہالوجن بلب کو دبا کر ساکٹ میں ڈالیں۔ موسم بہار کی کلپ. بلب پر رہ جانے والی انگلیوں کے نشانات جیسی گندگی بلب کی زندگی کو متاثر کرے گی۔ ②لیمپ روم کو میز پر رکھیں، پاور آن کرنے کے بعد، لیمپ کے فوکسنگ نوب ہول ("←→" کے ساتھ نشان زد) کو ایڈجسٹ کرنے کے لیے ایک خاص سکریو ڈرایور استعمال کریں، تاکہ فلیمنٹ دیوار پر لگ جائے 1-2 m دور، اور فلیمینٹ امیج کو ایڈجسٹ کیا گیا ہے۔ پھر فلیمینٹ کے سوراخ کو ایڈجسٹ کرنے کے لیے لیمپ کی اونچائی کو ایڈجسٹ کریں ("──" کے ساتھ نشان زد) تاکہ فلیمینٹ کی پوزیشن مناسب ہو؛ پھر لیمپ کے بائیں اور دائیں پوزیشن ایڈجسٹمنٹ سکرو کے سوراخوں کو ایڈجسٹ کریں ("──" کے ساتھ نشان زد) تاکہ فلیمنٹ کی بائیں اور دائیں پوزیشن کو مناسب بنایا جا سکے۔
2. خوردبین میں روشنی کے منبع الیومینیٹر (فلامینٹ) کی پوزیشن کے معائنے اور درستگی کا مقصد الیومینیٹر کے تصویری سرے کو معروضی لینس کے منظر کے میدان میں ایڈجسٹ کرنا ہے، اور اس بات کو یقینی بنانا ہے کہ منظر کا میدان خوردبین کی روشنی کے منبع کے نقطہ نظر سے مکمل اور یکساں طور پر موصول ہوئی ہے۔ روشنی، جو Kühler روشنی کے نظام کو ایڈجسٹ کرنے کے لیے ایک شرط ہے۔ بنیادی اوزار درکار ہیں: سینٹرنگ دوربینیں خوردبین کی خریداری سے لیس ہیں۔ ① لیمپ ہاؤس میں فراسٹڈ شیشے کی آستین کو ان پلگ کریں اور لیمپ ہاؤس کو دوبارہ مائکروسکوپ پر رکھیں ② ایک 10× آبجیکٹیو لینس منتخب کریں، نمونہ تلاش کرنے کے لیے لائٹ سورس پروگرام کو آن کریں اور فوکس کو واضح طور پر ایڈجسٹ کریں، اور پھر 40× مقصد کا استعمال کریں۔ نمونے کو واضح طور پر فوکس کرنے کے لیے لینس (40× مقصدی لینس فلیمینٹ کی پوری تصویر کو واضح طور پر دیکھا جا سکتا ہے)؛ ③ کنڈینسر کے یپرچر ڈایافرام اور فیلڈ ڈایافرام دونوں کو زیادہ سے زیادہ کھولیں۔ ④ آئی پیس میں سے ایک کو ان پلگ کریں، اسے سنٹرنگ دوربین سے تبدیل کریں، سفید حصے کو پکڑیں، اور کالے آئی پیس کو دوسرے ہاتھ سے بڑھا دیں، فلیمینٹ کی تصویر بینائی کے میدان میں دیکھی جا سکتی ہے۔ ⑤اگر فلیمینٹ کی پوزیشن مناسب نہیں ہے تو، "──" سوراخ کو ایڈجسٹ کریں، افقی سمت میں فلیمینٹ کی تصویر کو ایڈجسٹ کریں، "──" سوراخ کو ایڈجسٹ کریں، اور فلیمینٹ امیج کو عمودی سمت میں ایڈجسٹ کریں جب تک کہ فلیمینٹ امیج کو سرکلر میں ایڈجسٹ نہ کر لیں۔ وہ تصویر جو صرف مقصدی لینس کے یپرچر کو بھرتی ہے۔ ⑥ ایڈجسٹمنٹ کے بعد، فرسٹڈ شیشے کی آستین کو اس کی اصل پوزیشن پر واپس ڈالیں، سینٹرنگ دوربین کو ان پلگ کریں، اور اگلی ایڈجسٹمنٹ کے لیے آئی پیس کو تبدیل کریں۔ مائیکروسکوپ کے باہر الیومینیشن لائٹ سورس لیمپ روم کی مذکورہ بالا ایڈجسٹمنٹ اور مائکروسکوپ کے اندر روشنی کے منبع الیومینیٹر کی پوزیشن کی انشانکن کو صرف اس وقت انجام دینے کی ضرورت ہے جب مائکروسکوپ کو پہلی بار انسٹال اور ڈیبگ کیا گیا ہو اور بلب لگ جائے۔ تبدیل کر دیا گیا الجھن کی صورت میں، آپ مندرجہ بالا مراحل کے مطابق اسے اصل حالت میں بحال کر سکتے ہیں۔
3. کوہلر الیومینیشن (کوہلر) سسٹم کی درست ایڈجسٹمنٹ مائکروسکوپ کی درست ایڈجسٹمنٹ، اہم کاموں میں سے ایک الیومینیشن لائٹ پاتھ سسٹم کی ایڈجسٹمنٹ ہے، اور کلید کوہلر الیومینیشن سسٹم کی ایڈجسٹمنٹ ہے۔ ہر ایک کے لیے جو خوردبین استعمال کرتا ہے، خاص طور پر وہ لوگ جو مائیکرو گراف لیتے ہیں، انہیں Kühler الیومینیشن سسٹم کے اصولوں اور اس کے ایڈجسٹمنٹ کے اقدامات کے بارے میں ایک خاص سمجھ اور مہارت حاصل ہونی چاہیے، تاکہ وہ خوردبین کے افعال کو مکمل طور پر ادا کر سکیں۔ نتیجے میں آنے والی تصاویر زیادہ مستقل اور کامل ہو سکتی ہیں۔ Kühler الیومینیشن سسٹم کا اصول آسان ہے: روشنی کے منبع الیومینیٹر پر کسی بھی نقطہ سے خارج ہونے والی روشنی خوردبین کے نقطہ نظر کے میدان کو روشن کر سکتی ہے، اور روشنی کے منبع الیومینیٹر پر ہر نقطہ سے خارج ہونے والی روشنی کو جمع کیا جاتا ہے، اور یہ خوردبین کے نقطہ نظر کا میدان. ایک بہت ہی کافی اور یکساں روشنی حاصل کی جاتی ہے۔ کوہلر الیومینیشن سسٹم کو ایڈجسٹ کرنے کا مقصد مشاہدہ شدہ فیلڈ آف ویو کے لیے یکساں اور کافی روشنی حاصل کرنا ہے، اور آوارہ روشنی کو امیجنگ سسٹم پر اثر انداز ہونے یا مداخلت کرنے سے روکنا ہے، تاکہ فوٹو گرافی کے دوران منفی پر دھند کی تشکیل سے بچا جا سکے۔ ہائی ایڈجسٹمنٹ Kühler الیومینیشن سسٹم کے ضروری اجزاء: فیلڈ ڈایافرام، کنڈینسر سسٹم آن ایکسس ایڈجسٹمنٹ کے ساتھ۔ ① 10× معروضی لینس اور 10× آئی پیس کو منتخب کریں ② کنڈینسر کے سامنے والے لینس کو آپٹیکل پاتھ میں رکھیں، یپرچر ڈایافرام کو اعتدال پسند پوزیشن میں ایڈجسٹ کریں (بہت بڑا یا بہت چھوٹا نہیں)، پھر کنڈینسر کو اوپر کریں۔ اوپری پوزیشن پر، اور کنڈینسر ٹرن ٹیبل کو برائٹ فیلڈ "J" پوزیشن پر ایڈجسٹ کریں ③ فیلڈ ڈایافرام کو کم سے کم (0.1) پر ایڈجسٹ کریں۔
④ مہر بند حیاتیاتی نمونہ اسٹیج پر رکھیں، روشنی کا منبع آن کریں، اور واضح طور پر توجہ مرکوز کریں
⑤ منظر کے میدان میں ایک مقامی طور پر روشن علاقہ یا روشن جگہ نظر آئے گی، جو فیلڈ ڈایافرام کی دھندلی تصویر ہے، جس میں نمونے کی تفصیلات واضح طور پر دیکھی جا سکتی ہیں۔ نمونے کی تفصیلات واضح طور پر دیکھیں
⑥ کنڈینسر کو تھوڑا سا نیچے کریں، تاکہ منظر کے میدان میں روشن دھبہ آہستہ آہستہ تنگ ہو جائے اور آہستہ آہستہ ایک واضح کثیر الاضلاع تصویر بن جائے، جو فیلڈ ڈایافرام کی واضح تصویر ہے۔
⑦ عام حالات میں، کثیرالاضلاع تصویر منظر کے میدان کے مرکز میں نہیں ہوتی ہے۔ کنڈینسر کے سینٹرنگ سکرو کے ایک جوڑے کو ایڈجسٹ کرنا ضروری ہے تاکہ منظر کے میدان کی کثیرالاضلاع تصویر کو مرکز کی پوزیشن میں ایڈجسٹ کیا جا سکے۔
⑧ دھیرے دھیرے ویو ڈایافرام کے فیلڈ کو کھولیں تاکہ کثیرالاضلاع تصویر کو منظر کے میدان کا ایک کندہ شدہ کثیرالاضلاع بن جائے، اور مزید سیدھ کی حالت کو چیک کریں۔ اگر سیدھ مثالی نہیں ہے تو، سیدھ کے سکرو کو تھوڑا سا ایڈجسٹ کرنا جاری رکھیں؛
⑨ فیلڈ ڈایافرام کو تھوڑا سا کھولیں تاکہ منظر کے میدان کے کنارے پر کثیرالاضلاع تصویر غائب ہو جائے۔ اس مقام پر، Kühler لائٹنگ سسٹم کی ایڈجسٹمنٹ مکمل ہو گئی ہے۔ Kühler الیومینیشن سسٹم کو ایڈجسٹ کرنے کے بعد، منظر کا پورا میدان یکساں طور پر روشن ہو گیا، اور مائیکرو گراف معمول کے برعکس کے ساتھ روشن اور واضح تھے۔
