ڈارک فیلڈ مائکروسکوپی کیا ہے؟ ایک خلیے کو کتنا چھوٹا دیکھا جا سکتا ہے؟
ڈارک فیلڈ خوردبین ایک قسم کی نظری خوردبین ہے، جسے الٹرا مائیکروسکوپ بھی کہا جاتا ہے۔ تاریک فیلڈ مائکروسکوپ کے کنڈینسر کے بیچ میں ایک لائٹ شیلڈ ہے تاکہ روشنی کی روشنی براہ راست انسانی لینس میں داخل نہ ہو۔ معروضی عینک میں صرف نمونہ سے منعکس اور منتشر روشنی کو داخل ہونے کی اجازت ہے۔ اس لیے، فیلڈ آف ویو کا پس منظر کالا ہے اور اشیاء کے کنارے روشن ہیں۔ کی اس قسم کی خوردبین 4~200nm تک چھوٹے ذرات دیکھ سکتی ہے، اور ریزولوشن عام خوردبین سے 50 گنا زیادہ ہو سکتی ہے۔
اصول
ڈارک فیلڈ مائکروسکوپ کو ٹنڈال آپٹیکل اثر کے اصول کو استعمال کرتے ہوئے عام آپٹیکل مائکروسکوپ کی ساخت کی بنیاد پر تبدیل کیا جاتا ہے۔ ڈارک فیلڈ کنڈینسر روشنی کے منبع کے مرکزی بیم کو بلاک کرنے کی اجازت دیتے ہیں۔ نیچے سے اوپر کے نمونے کے ذریعے معروضی لینس میں داخل ہونا ممکن نہیں ہے۔ نتیجے کے طور پر، روشنی اپنا راستہ بدل لیتی ہے اور مشاہدہ شدہ نمونے پر ترچھا شعاع کرتی ہے۔ روشنی کا سامنا کرتے وقت نمونہ منعکس یا بکھر جاتا ہے۔ بکھری ہوئی روشنی کو معروضی عینک میں ڈالا جاتا ہے، اس لیے دیکھنے کا پورا میدان اندھیرا ہے۔
تاریک فیلڈ مائکروسکوپی کا بنیادی اصول ٹنڈال اثر ہے۔ جب روشنی کا ایک شہتیر کسی تاریک کمرے سے گزرتا ہے، تو ہوا میں ایک روشن دھول "پاتھ وے" کا مشاہدہ کیا جا سکتا ہے جس کی سمت واقع روشنی کی سیدھی ہے۔ یہ رجحان Tyndall اثر ہے. ڈارک فیلڈ مائکروسکوپ کو ایک عام آپٹیکل مائکروسکوپ پر ڈارک فیلڈ کنڈینسر سے تبدیل کرنے کے بعد، کنڈینسر کے اندرونی پیرابولک ڈھانچے کے بند ہونے کی وجہ سے، معائنہ کرنے والی چیز کی سطح پر شعاع ریزی کرنے والی روشنی براہ راست مقصد میں داخل نہیں ہو سکتی۔ لینس اور آئی پیس، اور صرف بکھری ہوئی روشنی وہاں سے گزر سکتی ہے، اس طرح منظر کے میدان کو کم کر دیتا ہے۔ اندھیرا ہے چونکہ تاریک فیلڈ خوردبین براہ راست مشاہدے کے نظام میں شفاف روشنی نہیں خارج کرتی ہے، جب کوئی چیز نہ ہو تو منظر کا میدان تاریک ہوتا ہے اور کسی چیز کا مشاہدہ کرنا ناممکن ہوتا ہے۔ جب کوئی چیز ہوتی ہے تو، روشنی اس چیز سے پیچھے ہٹتی ہے اور بکھری ہوئی روشنی تاریک پس منظر میں چمکتی نظر آتی ہے۔ . جب کسی تاریک میدان میں کسی چیز کا مشاہدہ کیا جائے تو زیادہ تر الیومینیشن لائٹ ریفریکٹ ہوتی ہے۔ آبجیکٹ (نمونہ) کے محل وقوع، ساخت اور موٹائی کی وجہ سے روشنی کے بکھرنے اور انحراف میں بہت فرق ہوتا ہے۔
ساخت اور ترمیم
تاریک فیلڈ خوردبین کا بنیادی ڈھانچہ ایک عام خوردبین نظری سیٹ کے علاوہ روشنی کی رکاوٹ ہے۔ ایک عام خوردبین کو ڈارک فیلڈ مائکروسکوپ میں تب تک تبدیل کیا جا سکتا ہے جب تک کہ کنڈینسر ہٹنے کے قابل ہو اور بریکٹ کا قطر ڈارک فیلڈ کنڈینسر لگانے کے لیے موزوں ہو۔ جب کوئی ڈارک فیلڈ کنڈینسر نہ ہو تو، آپ ایک مرکزی لائٹ شیلڈ بنانے کے لیے موٹے سیاہ کاغذ کا استعمال کر سکتے ہیں اور ڈارک فیلڈ ایفیکٹ حاصل کرنے کے لیے اسے عام خوردبین کے کنڈینسر کے نیچے فلٹر فریم پر رکھ سکتے ہیں۔ لائٹ شیلڈ کا استعمال روشنی کے منبع کے وسط میں روشنی کو روکنے کے لیے کیا جاتا ہے تاکہ روشنی صرف آس پاس سے نمونے میں داخل ہو سکے۔ سائز یپرچر کے سائز کے برابر ہے۔ مختلف میگنیفیکیشنز مختلف یپرچر استعمال کرتے ہیں، اس لیے مختلف لائٹ بلاکس بنانے کی ضرورت ہے۔
عملی درخواست
ڈارک فیلڈ مائکروسکوپی کا استعمال اکثر غیر داغدار شفاف نمونوں کو دیکھنے کے لیے کیا جاتا ہے۔ چونکہ ان نمونوں میں ارد گرد کے ماحول کی طرح ایک اضطراری انڈیکس ہوتا ہے، اس لیے انہیں عام روشن فیلڈ حالات میں واضح طور پر دیکھنا مشکل ہوتا ہے۔ لہذا، تاریک فیلڈ کے حالات کو نمونے اور پس منظر کے درمیان تضاد کو بہتر بنانے کے لیے استعمال کیا جاتا ہے۔ اس قسم کی خوردبین 4~200nm تک چھوٹے ذرات کو دیکھ سکتی ہے۔ یہ صرف شے کے وجود، حرکت اور سطح کی خصوصیات کو دیکھ سکتا ہے، لیکن شے کی باریک ساخت میں فرق نہیں کر سکتا۔ طبی لحاظ سے، ڈارک فیلڈ مائکروسکوپی عام طور پر پیلڈ اسپیروکیٹس کی جانچ کے لیے استعمال ہوتی ہے۔ یہ ایک پیتھوجین ٹیسٹ ہے، جو آتشک کی ابتدائی تشخیص کے لیے بہت اہمیت کا حامل ہے۔
