بیکٹیریا کی تحقیق کے لیے کون سی خوردبین استعمال کی جانی چاہیے۔
آپٹیکل خوردبین اشیاء کو دیکھنے اور میگنفائنگ کرنے کا ایک بہت ہی درست ٹول ہے۔ مختلف نظری خوردبین مختلف نمونوں کی جانچ کر سکتی ہیں۔ صارفین کو مائکروبیل ریسرچ، پلانٹ ریسرچ، اور جانوروں کی تحقیق جیسے شعبوں میں بیکٹیریل سائز کی مقدار دیکھنے کے قابل ہونے کی ضرورت ہے۔ یہ مضمون نمونوں کو چھانٹتے وقت استعمال کرنے کے لیے بہترین قسم کی خوردبین کی گہرائی میں جانچ کرتا ہے۔
اس سوال کا جواب دینے کے لیے جراثیم کی جسامت، انسانی بصارت کی وضاحت، خوردبین کی ریزولیوشن اور دیگر عوامل کا استعمال کیا جا سکتا ہے۔
1. بیکٹیریل خلیات عام طور پر چند مائکرون کا قطر رکھتے ہیں۔ Escherichia coli کے سائز پر غور کریں، جو تقریباً 1 um لمبا اور 0.5 um چوڑا ہے۔
2. ریزولوشن سب سے چھوٹا فاصلہ ہے جس پر دو آبجیکٹ پوائنٹس کو ایک دوسرے سے واضح طور پر ممتاز کیا جا سکتا ہے۔
دو آبجیکٹ پوائنٹس کے درمیان سب سے کم فاصلہ جو ایک بار تصویر پر مائکروسکوپ کے زوم ان ہونے کے بعد واضح طور پر پہچانا جا سکتا ہے اسے خوردبین کی ریزولوشن کہا جاتا ہے۔
آلے کی ریزولیوشن میں پیمائش کی جانے والی چیز کے مائکرو اسٹرکچر کے بارے میں تفصیلات پیش کرنے کی صلاحیت کو بیان کیا گیا ہے۔ فراہم کردہ معلومات زیادہ تفصیلی ہے ریزولوشن جتنی زیادہ ہے۔ زیادہ سے زیادہ میگنیفیکیشن سے آگے، میگنیفیکیشن کو غلط میگنیفیکیشن کہا جاتا ہے، اور غلط میگنیفیکیشن زیادہ مخصوص ساختی تفصیلات کو ظاہر کرنے سے قاصر ہے۔
3. کم سے کم فاصلہ جسے اوسط انسانی آنکھ دو دھبوں کے درمیان فرق کر سکتی ہے 0.1 ملی میٹر ہے، بشرطیکہ کافی روشنی ہو اور یہ فاصلہ ایک فٹ سے زیادہ ہو۔
4. آخر میں، جراثیم کی موجودگی کا پتہ لگانے کے لیے میگنیفیکیشن کم از کم: 0.1mm 0.5um=1000 5=200 بار ہونا چاہیے۔ تاہم، اس میگنیفیکیشن میں نظر آنے والے بیکٹیریا (Escherichia coli) صرف تھوڑا سا دھبہ ہے۔ باریک ساختی تفصیلات دیکھنے کے لیے خوردبین کی میگنیفیکیشن کو ایڈجسٹ کیا جانا چاہیے۔
5. نظر آنے والی روشنی کی طول موج (390–770 nm) عام آپٹیکل خوردبین کی ریزولوشن پر ایک حد رکھتی ہے، جو اکثر انہیں 1،000 بار سے زیادہ میگنیفائی کرنے سے روکتی ہے۔ 1000 بار سے زیادہ میگنیفیکیشن کو غلط میگنیفیکیشن سمجھا جاتا ہے اور یہ بہتر ساختی معلومات پیش نہیں کر سکتے ہیں۔
6. الیکٹران مائکروسکوپ میں 800،000-گنا میگنیفیکیشن کی گنجائش ہوتی ہے۔ یہ ایک باقاعدہ نظری خوردبین کے طور پر اسی بنیادی بنیاد پر کام کرتا ہے، جو مختصر طول موج الیکٹران لہروں کو پیدا کرنے کے لیے ہائی وولٹیج کا استعمال کرتا ہے۔
بیکٹیریا جو صرف سوئی کی نوک کے سائز کے ہوتے ہیں اور چھوٹے نقطوں کے طور پر ظاہر ہوتے ہیں جب 400 بار (10x، 40x) بڑھایا جائے تو شاید ہی اس کا پتہ لگایا جاسکے۔ دیکھنے کے لیے، ہم عام طور پر 1000 گنا (10x، 100x) تک بڑھاتے ہیں۔ یہاں تک کہ خاص رنگ کے فلاجیلا کے اضافے کے ساتھ، اس مقام پر بیکٹیریم کی شکل اب بھی صاف نظر آتی ہے۔ آپ کو 1000 بار بڑا کرنے کے لیے آئل لینس کی ضرورت ہے۔ 'آئل لینس' کے لیے دیودار کے تیل کا ایک قطرہ کور گلاس اور مقصدی لینس کے درمیان رکھنا ہوتا ہے۔ چونکہ دیودار کے تیل میں ہوا سے زیادہ روشنی کا اضطراب انڈیکس ہوتا ہے، اس لیے زیادہ اضافہ استعمال کیا جا سکتا ہے۔
نمبر 10x اور 40x لینس کی بالترتیب 10x اور 40x میگنیفیکیشن کی نمائندگی کرتے ہیں۔ خوردبین کی مجموعی میگنیفیکیشن کا تعین کرنے کے لیے، آئی پیس کی میگنیفیکیشن کو مقصد کی میگنیفیکیشن سے ضرب دیں۔ مڈل اسکولوں میں استعمال ہونے والی خوردبینوں میں قابل تبادلہ آئی پیس اور معروضی لینز شامل ہیں۔ آنکھ کے ٹکڑے عام طور پر 5x اور 10x ہوتے ہیں۔ میں نے Escherichia coli (E. coli)، Staphylococcus aureus، Bacillus subtilis، اور Bacillus megaterium کو ایک چھوٹی خوردبین کا استعمال کرتے ہوئے دیکھا ہے جس میں ایک آئی پیس ہے جو اکثر صرف 10x ہوتی ہے۔ (بیضوں کو دیکھنے کے لئے استعمال کیا جاتا ہے)۔
