لیزر کنفوکل مائکروسکوپ کے کام کرنے کا اصول
لیزر کنفوکل مائکروسکوپ کے کام کرنے کا اصول
اولمپس لیزر کنفوکل مائکروسکوپ ایک پتہ لگانے والا ہے جو سگنل حاصل کرسکتا ہے۔ اس کا کام کرنے والا اصول یہ ہے کہ ایک نقطہ روشنی کا منبع فلوروسینس مائکروسکوپ سے گزرنے کے بعد "ایری ڈسک" کے نام سے ایک وسیع جگہ کے طور پر امیج کیا جائے گا۔ معیاری وائٹ لائٹ انٹرفیومیٹرک کنفوکل مائیکروسکوپ میں، فوکل ہوائی جہاز کے باہر خارج ہونے والی روشنی کو ایک پن ہول کے ذریعے روکا جاتا ہے جس کا سائز یہ طے کرتا ہے کہ کتنی ہوا دار ڈسک ڈیٹیکٹر میں داخل ہو سکتی ہے۔ پن ہول جتنا چھوٹا ہوگا، نتیجے میں آنے والی تصویر اتنی ہی تیز ہوگی، اور تصویر مدھم ہوگی کیونکہ زیادہ تر روشنی ضائع ہوجاتی ہے۔ یپرچر پن ہول جتنا چھوٹا ہوگا، ریزولیوشن اتنا ہی بہتر ہوگا، لیکن — ایک بار پھر — زیادہ روشنی کا سگنل ضائع ہوتا ہے۔ اولمپس لیزر کنفوکل مائکروسکوپ ایک ہی وقت میں رنگین سی سی ڈی امیج اور لیزر اسکیننگ کنفوکل امیج فراہم کر سکتا ہے۔ اولمپس کنفوکل لیزر مائکروسکوپ ایک روشنی کے منبع، ایک نمونے اور ایک ڈیٹیکٹر کے کنفوکل سیٹ اپ کے ذریعے اونچائی کی پیمائش کرنے کے قابل ہیں۔ جب نمونہ معروضی لینس کے فوکل ہوائی جہاز پر واقع ہوتا ہے اور نمونے کی سطح سے منعکس ہونے والی لیزر روشنی کو کنفوکل یپرچر میں مرکوز کیا جاتا ہے، تو فوٹو ڈیٹیکٹر نمونے سے سگنل وصول کرے گا۔ جب نمونہ آؤٹ آف فوکس پوزیشن میں ہوتا ہے، تو کنفوکل یپرچر کو لیزر سگنل نہیں ملتا، اس لیے صرف ان فوکس سگنل ہی اکٹھا کیا جاتا ہے۔ یہ خصوصیت اولمپس لیزر کنفوکل مائکروسکوپ کے آپٹیکل سیکشننگ فنکشن کو محسوس کر سکتی ہے۔
کنفوکل لیزر مائیکروسکوپی کے فوائد
1. لیزر لائٹ کو روشنی کے منبع کے طور پر استعمال کرتے ہوئے، متعلقہ فلوروسینٹ پروب کو نشان زد کرنے کے بعد، نمونے کو پوائنٹ بہ پوائنٹ سکین کیا جاتا ہے تاکہ دو جہتی آپٹیکل کراس سیکشنل امیجز کی تہہ بہ تہہ حاصل کی جا سکے۔ اس میں "سیل CT" کا فنکشن ہے اور تین جہتی تصاویر حاصل کرنے کے لیے کمپیوٹر کے سہ جہتی تعمیر نو سافٹ ویئر کی مدد سے کیا جا سکتا ہے، جسے کسی بھی زاویے پر گھمایا جا سکتا ہے تاکہ خلیات اور بافتوں کے تین جہتی شکل اور مقامی تعلقات کا مشاہدہ کیا جا سکے۔
2. یہ جاندار خلیوں اور بافتوں کا بغیر کسی نقصان کے مشاہدہ کر سکتا ہے، اور متحرک طور پر زندہ خلیوں کی جسمانی معلومات کی پیمائش کر سکتا ہے جیسے کہ خلیات میں Ca ion کا ارتکاز اور pH قدر؛
3. یہ سیل میمبرین، انٹر سیلولر کمیونیکیشن، سیل فیوژن، سائٹوسکیلیٹن لچک، وغیرہ کی روانی کی پیمائش کر سکتا ہے، اور انٹرا سیلولر "سرجری" کو مکمل کرنے کے لیے "ہلکے چاقو" کے طور پر استعمال کیا جا سکتا ہے۔ یہ ٹیکنالوجی متحرک اور مقداری مشاہدے اور زندہ خلیوں اور بافتوں کی پیمائش کے قابل بناتی ہے۔
