کنفوکل مائکروسکوپ اور عام آپٹیکل مائکروسکوپ کا موازنہ
خوردبین خلیات کا مشاہدہ کرنے کا اہم ذریعہ ہے۔ روشنی کے منبع پر منحصر ہے، اسے دو قسموں میں تقسیم کیا جا سکتا ہے: نظری خوردبین اور الیکٹران خوردبین۔ سابقہ روشنی کے منبع کے طور پر مرئی روشنی (الٹرا وائلٹ مائکروسکوپ سے الٹرا وائلٹ لائٹ) کا استعمال کرتا ہے، جب کہ بعد میں روشنی کے منبع کے طور پر الیکٹران بیم کا استعمال کرتا ہے۔ عام آپٹیکل مائکروسکوپ اور لیزر کنفوکل مائکروسکوپ ایک ہی آپٹیکل مائکروسکوپ سے تعلق رکھتے ہیں۔
I. جنرل آپٹیکل مائکروسکوپ
عام حیاتیاتی خوردبین تین حصوں پر مشتمل ہے، یعنی: ① روشنی کا نظام، بشمول روشنی کا منبع اور کنڈینسر؛ ② آپٹیکل میگنیفیکیشن سسٹم، جو مقاصد اور آئی پیسز پر مشتمل ہوتا ہے، مائکروسکوپ کا مرکزی باڈی ہے، کروی خرابی اور رنگین خرابی کو ختم کرنے کے لیے، آئی پیسز اور مقاصد ایک پیچیدہ لینس گروپ پر مشتمل ہوتے ہیں۔ ③ مکینیکل ڈیوائس، مواد کو ٹھیک کرنے اور سہولت کے مشاہدے کے لیے استعمال کیا جاتا ہے۔
خوردبین آبجیکٹ واضح ہے نہ صرف اضافہ کی طرف سے مقرر کیا جاتا ہے، لیکن یہ بھی خوردبین کی حل کرنے کی طاقت (قرارداد) کے ساتھ، حل کرنے کی طاقت سے مراد خوردبین (یا ہدف 25 سینٹی میٹر سے انسانی آنکھ) آبجیکٹ زوئی کی صلاحیت کے چھوٹے وقفوں کی تمیز کر سکتے ہیں. حل کرنے والی طاقت کے سائز کا تعین روشنی کی طول موج اور آئینے کے منہ کی شرح اور میڈیم کے ریفریکٹیو انڈیکس سے ہوتا ہے، جس کا فارمولہ میں اظہار کیا گیا ہے:
R=0.61λ /NANA=nsin /2 جہاں: n=میڈیم کا ریفریکٹیو انڈیکس؛=آئینے کے منہ کا زاویہ (تناؤ کے زاویہ کے معروضی عینک کے منہ پر نمونہ)، NA=آئینے کے منہ کی شرح (عددی یپرچر)۔ آئینے کے منہ کا زاویہ ہمیشہ 180؟ سے کم ہونا چاہئے، لہذا سینا/2 کی زوئی قدر ضروری طور پر 1 سے کم ہو۔
آپٹیکل لینز کی تیاری میں استعمال ہونے والے شیشے کا ریفریکٹیو انڈیکس 1.65 ~ 1.78 ہے، میڈیم کا ریفریکٹیو انڈیکس شیشے کے جتنا قریب ہوتا ہے اتنا ہی بہتر ہوتا ہے۔ خشک آبجیکٹیو لینس کے لیے، ہوا کے لیے میڈیم، آئینے کے منہ کی شرح عام طور پر 0 ہوتی ہے۔{6}}5 ~ 0.95; درمیانے درجے کے طور پر دیودار کے تیل کے ساتھ آئل لینس، آئینے کے منہ کی شرح 1.5 کے قریب ہوسکتی ہے۔
عام روشنی کی طول موج 400~700nm، لہذا مائکروسکوپ کو حل کرنے کی طاقت کی قیمت 0.2μm سے کم نہیں ہوگی، انسانی آنکھ کی حل کرنے کی طاقت 0.2mm ہے، لہذا مائکروسکوپ زوئی میگنیفیکیشن کا عمومی ڈیزائن عام طور پر 1000X ہے۔
دوسرا، لیزر کنفوکال اسکیننگ خوردبین
لیزر کنفوکل اسکیننگ مائیکروسکوپ (لیزر کنفوکل اسکیننگ مائیکروسکوپ)، ایک لیزر کے ساتھ ایک اسکیننگ لائٹ سورس کے طور پر، پوائنٹ بہ نقطہ، لائن بہ لائن، سطح بہ سطح تیزی سے اسکیننگ امیجنگ، اسکیننگ لیزر اور فلوروسینس کلیکشن ایک مشترکہ مقصد، مقصدی اسکیننگ لیزر فوکسنگ پوائنٹ۔ ، بلکہ آبجیکٹ پوائنٹ کی فوری امیجنگ۔ لیزر بیم کی کم طول موج کی وجہ سے، بیم بہت ٹھیک ہے، لہذا کنفوکل لیزر اسکیننگ مائکروسکوپ کی ریزولوشن ایک عام آپٹیکل مائکروسکوپ سے تقریباً 3 گنا زیادہ ہے۔ سسٹم پر ایک بار فوکس کیا جاتا ہے اور اسکین نمونے کے ایک جہاز تک محدود ہے۔ جب فوکس کرنے والی گہرائی ایک جیسی نہ ہو تو نمونے کی مختلف گہرائی کی سطحوں کی تصاویر حاصل کی جا سکتی ہیں، اور یہ تصویری معلومات کمپیوٹر میں محفوظ کی جاتی ہیں، کمپیوٹر کے تجزیہ اور تخروپن کے ذریعے، یہ خلیے کے نمونے کی سہ جہتی ساخت کو دکھا سکتی ہے۔ .
