خوردبین سلائیڈز بنانے کا طریقہ
مائکروسکوپ سلائیڈز بنانے کے تین طریقے ہیں:
1. سمیر کا طریقہ
سمیر طریقہ تیاری کا ایک طریقہ ہے جس میں مواد کو سلائیڈ پر یکساں طور پر پھیلایا جاتا ہے۔
سمیر مواد میں یون سیلولر جاندار، چھوٹے طحالب، خون، بیکٹیریل کلچر، پودوں اور جانوروں کے ڈھیلے ٹشوز، سپرم نیسٹس، اینتھرز وغیرہ شامل ہیں۔
رگڑتے وقت توجہ دی جانی چاہئے:
(1) سلائیڈ صاف ہونی چاہیے۔
(2) سلائیڈ کو فلیٹ رکھا جانا چاہیے۔
3) کوٹنگ یکساں ہونی چاہیے۔ کوٹنگ مائع کی بوند کو سلائیڈ کے بیچ کے دائیں طرف لگائیں اور اسے چھری یا ٹوتھ پک وغیرہ کے بلیڈ سے اچھی طرح پھیلا دیں۔
4) کوٹنگ پتلی ہونی چاہئے۔ ایک اور سلائیڈ کو پشر کے طور پر استعمال کریں، ایپلیکیشن سلوشن کے قطرے کے ساتھ سلائیڈ کی سطح پر آہستہ سے دائیں سے بائیں دھکیلیں (دو سلائیڈوں کے درمیان زاویہ 30 ڈگری سے 45 ڈگری ہونا چاہئے)، اور یکساں طور پر پتلی تہہ لگائیں۔
5) درستگی۔ اگر فکسشن کی ضرورت ہو تو، کیمیکل فکسیٹیو یا ڈیسیکیشن (بیکٹیریل) فکسیشن کا استعمال کریں۔
6) داغ لگانا۔ بیکٹیریا کے لیے میتھیلین بلیو اور خون کے لیے ریچل کا داغ استعمال کریں۔ داغدار حل کو پوری لیپت سطح کا احاطہ کرنا چاہئے۔
7) کللا کریں۔ جاذب کاغذ پر جذب کریں یا خشک بیک کریں۔
8) فلم کو سیل کریں۔ طویل مدتی اسٹوریج کے لیے، کینیڈین ٹری فلم استعمال کریں۔
2. فلم دبانے کا طریقہ
پریشر فلم کا طریقہ وہ حیاتیاتی مواد ہے جو سلائیڈ اور کور شیٹ کے درمیان رکھا جاتا ہے، ایک خاص دباؤ کا اطلاق کرتے ہوئے، ٹشو سیلز کو تیاری کے طریقے کے علاوہ دبایا جائے گا۔
(1) مواد لے لو. سیل ڈویژن کا مشاہدہ، سیل ڈویژن مواد کے طور پر پرجوش، تازہ بافتوں کے خلیات کو منتخب کیا جانا چاہئے. جیسے جڑ کے اشارے، اسٹیم ٹپ میرسٹیمیٹک ٹشو، بون میرو سیل، اینتھرز (پولن مادر سیل)۔ Sperm Nest (spermatogonia) اور اسی طرح.
(2) طے کرنا۔ مادی فکسشن کا تعین ضرورت کے مطابق کیا جا سکتا ہے، مادی دباؤ کی فلم کا مشاہدہ کرنے کے فوراً بعد، الگ سے فکسڈ ٹریٹمنٹ نہیں کر سکتے (اور داغ دھبے کی ہم آہنگی)؛ مواد کو فوری طور پر معائنہ کے بعد نہیں ہے، مواد ایک fixative کے ساتھ مقرر کیا جا سکتا ہے (عام طور پر الکحل acetate fixative کے ساتھ). 95% ایتھنول کے ساتھ دھونے کے بعد 2 ~ 24 گھنٹے (مواد پر منحصر) فکسڈ، 70% ایتھنول میں محفوظ، اسٹینڈ بائی۔
(3) علیحدگی۔ خلیات کو ہائیڈولیسس علیحدگی کے حل (جیسے 1N HCl یا ہائیڈروکلورک ایسڈ ایک الکحل محلول) علاج، عام علاج 6 ~ 20 منٹ، الگ کرنے کے بعد اور داغ لگنے سے پہلے پانی سے کلی کرنے کے ساتھ مواد کو پھیلانا آسان نہیں ہے۔
(4) داغ لگانا۔ داغ کی کئی قسمیں ہیں۔ کروموسوم کا مشاہدہ عام طور پر میجینٹا ایسیٹیٹ سٹیننگ سلوشن سے داغ لگانے کے لیے استعمال ہوتا ہے۔
(5) فلم دبانا۔ مواد کو سلائیڈ پر رکھیں، ایک قطرہ پانی یا سٹیننگ سلوشن ڈالیں، کور سلپ کو ڈھانپیں اور سلائیڈ کو اپنے انگوٹھے سے آہستہ سے دبائیں۔
(6) مشاہدہ۔ فلم کو دبانے کے بعد اسے خوردبین کے نیچے دیکھا جا سکتا ہے۔
