لیزر اسکیننگ ملٹی فوٹن مائکروسکوپی میں بہتری
لیزر اسکیننگ ملٹی فوٹن مائکروسکوپ آپٹیکل مائکروسکوپی کی ایک نمایاں بہتری ہے ، جو بنیادی طور پر زندہ خلیوں ، طے شدہ خلیوں ، اور ؤتکوں کی گہری ڈھانچے کا مشاہدہ کرنے کی صلاحیت میں ظاہر ہوتی ہے ، اور واضح اور تیز کثیر پرت زیڈ ہوائی جہاز کے ڈھانچے کو حاصل کرتی ہے ، یعنی آپٹیکل سلائسیں ، جو تین جہتی ٹھوس ڈھانچے کی تعمیر کے لئے استعمال کی جاسکتی ہیں۔ کنفوکال مائکروسکوپ ایک لیزر لائٹ ماخذ کا استعمال کرتا ہے ، جس میں مقصد لینس کے پورے فوکل طیارے کو بھرنے کے لئے بڑھایا جاتا ہے ، اور پھر مقصد لینس کے لینس سسٹم کے ذریعہ نمونہ کے فوکل طیارے پر بہت چھوٹے پوائنٹس میں تبدیل ہوجاتا ہے۔ معروضی لینس کے عددی یپرچر کے مطابق ، روشن الیومینیشن پوائنٹ کا قطر 0. 25-0. 8 μ m کے بارے میں ہے ، اور گہرائی تقریبا 0. {5-1. 5 μ میٹر کے بارے میں ہے۔ کنفوکل پوائنٹ کا سائز مائکروسکوپ ڈیزائن ، لیزر طول موج ، معروضی خصوصیات ، اسکیننگ یونٹ اسٹیٹ کی ترتیبات ، اور نمونہ کی خصوصیات کے ذریعہ طے کیا جاتا ہے۔ کسی فیلڈ مائکروسکوپ کی روشنی کی حد اور گہرائی بڑی ہوتی ہے ، جبکہ کنفوکال مائکروسکوپ کی روشنی فوکل طیارے کے فوکل پوائنٹ پر مرکوز ہوتی ہے۔ کنفوکال مائکروسکوپی کا بنیادی فائدہ یہ ہے کہ یہ موٹی فلوروسینٹ نمونوں (5 {{10} μ m یا اس سے زیادہ m یا اس سے زیادہ) پر عمدہ آپٹیکل سیکشننگ انجام دے سکتا ہے ، جس کی موٹائی تقریبا 0.5 0.5 سے 1.5 μ میٹر ہے۔ سیریز آپٹیکل سلائس امیجز کو مائکروسکوپ زیڈ محور اسٹپر موٹر کا استعمال کرتے ہوئے نمونہ کو اوپر اور نیچے منتقل کرکے حاصل کیا جاسکتا ہے۔ تصویری معلومات کا مجموعہ ہوائی جہاز کے اندر کنٹرول کیا جاتا ہے اور نمونہ پر موجود دیگر عہدوں سے خارج ہونے والے اشاروں کے ذریعہ مداخلت نہیں کی جائے گی۔ پس منظر کے فلوروسینس کے اثر و رسوخ کو دور کرنے اور سگنل سے شور کے تناسب کو بڑھانے کے بعد ، روایتی فیلڈ الیومینیشن فلوروسینس امیجز کے مقابلے میں کنفوکال امیجز کے اس کے برعکس اور حل میں نمایاں بہتری لائی گئی ہے۔ بہت سے نمونوں میں ، پیچیدہ نظام تشکیل دینے کے ل comple پیچیدہ ساختی اجزاء بنے ہوئے ہیں ، لیکن ایک بار جب آپٹیکل حصے کافی جمع کیے جاسکتے ہیں ، تو ہم ان کو تین جہتوں میں ان کی تشکیل نو کے لئے سافٹ ویئر کا استعمال کرسکتے ہیں۔ خلیوں یا ؤتکوں کے مابین پیچیدہ ساختی اور فعال تعلقات کو واضح کرنے کے لئے حیاتیاتی تحقیق میں یہ تجرباتی طریقہ وسیع پیمانے پر استعمال کیا گیا ہے۔
